遺伝子クローニング・検証
新規遺伝子やcDNAの発現確認、毒性チェック、機能試験を迅速に行う。
主な用途
- 発現確認
- 毒性スクリーニング
- 機能試験
無細胞タンパク質合成系は細胞を用いずにDNAやmRNAからタンパク質を直接合成する技術です。毒性タンパク質、膜タンパク質、非標準アミノ酸導入など、細胞培養では困難な用途に使われます。
無細胞タンパク質合成系は細胞膜の制約を受けずに生体外で転写と翻訳を行うシステム。主要素はRNAポリメラーゼ、リボソーム、tRNA、アミノアシル-tRNA合成酵素、エネルギー供給系、翻訳因子、イオン、および鋳型となるDNAやmRNAです。大腸菌S30ライセート、小麦胚芽抽出液、昆虫細胞ライセート、植物ライセート、哺乳類細胞ライセート、再構成型など複数種類があります。
細胞を使わないため毒性タンパク、膜タンパク質の合成が可能で、非標準アミノ酸やシグナルペプチド融合などの複雑な修飾の組み込みが容易です。反応時間が短いため多条件並列検討が可能、ファージディスプレイやリボソームディスプレイなどのスクリーニング技術と組み合わせ、迅速な抗体・酵素・結合タンパク質の進化工学を実現します。
鋳型、無細胞発現システム、エネルギー供給物、アミノ酸を混合し、一定温度・時間で反応させます。
無細胞タンパク質合成系は、研究開発から医薬製造まで、幅広い工程で使われます。
新規遺伝子やcDNAの発現確認、毒性チェック、機能試験を迅速に行う。
ファージディスプレイやリボソームディスプレイを用いた大規模スクリーニング、抗体・酵素の進化工学。
膜タンパク質の無細胞発現、脂質二分子層への挿入、構造解析、創薬スクリーニング。
ADC、二重特異性抗体、融合タンパク質などの無細胞発現による受託製造。GMP対応で医療応用へ。
無細胞タンパク質合成系は、複数のバイオテクノロジープラットフォームで活用されています。