研究用抗体（一次・二次抗体）

抗体は作製方法でモノクローナル、ポリクローナル、リコンビナントに分かれます。モノクローナルは単一エピトープを認識してロット間のばらつきが小さく、ポリクローナルは複数エピトープを認識するため低発現ターゲットの検出やシグナル増幅に向きます。リコンビナント抗体は配列が定義された発現系で作るためロット間再現性が高く、近年は各社が主力として拡充しています。

選定でとくに重視されるのが検証（バリデーション）データです。ノックアウト/ノックダウン検証、オーソゴナル検証（RNA-seqとの照合）、独立抗体による確認などが製品ページに掲載されているかで、再現性の担保度合いが変わります。用途（WB/IHC/IF/フロー/IP）ごとに検証済みか、推奨希釈や陽性・陰性コントロールの情報があるかも確認したい点です。

二次抗体は一次抗体の由来種（ラビット、マウスなど）とアイソタイプに合わせて選び、標識（Alexa Fluorなどの蛍光色素、HRPなどの酵素）を用途に合わせます。フローサイトメトリーでは直接標識した抗体を使うことも多く、多色パネルではフルオロフォアの組み合わせとスペクトルの重なりに注意が必要です。