中和バッファ（pH中和液）

抗体のProtein Aクロマトでは、目的物を低pH（おおむねpH3前後）で溶出します。低pHウイルス不活化（低pVI）でも、溶出プールを一定時間そのpHに保持してから中和します。いずれも酸性のままでは目的物が不安定で、凝集体（HMW）の生成や沈殿のリスクが高いため、保持後はすみやかにpHを戻す必要があります。中和バッファは、この「酸からの戻し」を担い、Tris-baseや高濃度Tris-HCl、リン酸塩、酢酸塩などを用いて終点pH（多くはpH5〜7付近）へ調整します。

中和では、終点pHを合わせるだけでなく、途中の局所的なpHスパイクと急激なpH変化を抑えることが重要です。原液を一度に加えると、接触界面で一時的に高pH・低pHの斑（むら）が生じ、その場で目的物が等電点近傍を通過して局所沈殿・凝集を起こすことがあります。撹拌しながら少量ずつ添加する、希釈した中和液を使う、または配管内で連続的に混合する（インライン中和）といった運用で、急峻なpH勾配を避けます。終点では導電率も次工程の要求に収まるよう、塩濃度・希釈率を併せて設計します。

実務では、ラボや初期開発では自家調製（Tris-baseの濃縮原液をその場で滴下）が手軽ですが、製造ではready-to-useの中和バッファや濃縮原液を採用し、調製ばらつきとバイオバーデン・エンドトキシンの管理を安定させる流れがあります。Tris系は緩衝域が中性付近で扱いやすい一方、温度依存性やCO2吸収によるpHドリフトに注意が要り、リン酸系は緩衝域や金属・カルシウムとの相性で選び分けます。終点pH・導電率・添加速度・撹拌・温度・保持時間を一連の条件として管理します。