溶出バッファ（低pH溶出液）

アフィニティやイオン交換では、平衡化・ロード・洗浄で担体に保持した目的物を、移動相の条件を変えて脱着させることで回収する。Protein A捕捉ではpHを下げてFcとリガンドの結合を弱める「低pH溶出」が一般的で、おおむねpH3〜4の酸性バッファを用いる。緩衝種にはグリシン-HCl、酢酸/酢酸ナトリウム、クエン酸/クエン酸ナトリウムなどがあり、目的pH帯での緩衝能とイオン強度、後工程との相性で選ぶ。

溶出pHは回収率と品質のトレードオフを決める主要因になる。pHを十分下げれば溶出は鋭く回収率も上がるが、酸感受性の抗体では低pH曝露で凝集体や断片が増えやすい。逆にpHが高すぎると溶出がブロードになり、回収率の低下やテーリングを招く。緩衝能の高いバッファを選び、溶出画分のpHプロファイルを安定させることが、回収率と凝集抑制の両立につながる。

Protein Aの低pH溶出画分はそのまま一定時間保持して低pHウイルス不活化に用いられることが多く、溶出pHはウイルス不活化条件とも連動する。溶出後は中和バッファ（Tris等）でpHを戻し、凝集を抑えながら後段のポリッシュへ渡す。調製は粉末・濃縮原液からの自家調製と、組成・pH・エンドトキシンまでQC済みで供給されるready-to-useがあり、規模拡大とともにready-to-useや濃縮原液の活用が広がっている。