ADC部位特異的コンジュゲーション試薬

従来のADCは、抗体表面に複数あるリジンのアミノ基や、鎖間ジスルフィド由来のシステインに薬剤リンカーを結合させるため、結合位置と本数がばらつき、DAR0〜8が混在した分布になります。DARが低すぎれば効力が落ち、高すぎれば疎水性凝集やクリアランス亢進を招くため、分布の広さは有効性・安全性・製造の再現性に直結します。部位特異的コンジュゲーション試薬は、結合点をあらかじめ規定することでこの分布を狭め、DAR2やDAR4に揃った均一なADCを与える点が最大の特徴です。

技術は大きく2系統に整理できます。(A)酵素的ライゲーションは、微生物トランスグルタミナーゼがグルタミン残基を、ソルターゼやイソペプチド結合形成タグ・キャッチャー系が特定配列を、糖鎖リモデリングがFcのN型糖鎖を、ホルミルグリシン生成酵素がアルデヒドタグを足場にして、規定位置へ反応基を導入します。(B)非標準アミノ酸の導入は、直交tRNA／アミノアシルtRNA合成酵素やアンバーサプレッション、無細胞系を用いて、アジドやケトンなどの反応性側鎖を持つ非天然アミノ酸を狙った一箇所に組み込みます。

現場での選定は、結合の均一性に加えて、導入効率（変換率）、抗体側の改変が必要か（タグ付加・アミノ酸置換・細胞株構築の要否）、生体直交反応の種類と速度、スケール対応とCDMO依存度が軸になります。多くは導入した足場へ、アジド-アルキンのSPAACやテトラジン-TCOのIEDDA、アルデヒド-アミノオキシのオキシムといった生体直交クリックでペイロードを連結するため、対応するヘテロ二官能リンカー・クリック試薬の入手性も含めて評価します。