オリゴ核酸合成機

オリゴ核酸合成機は、固相ホスホロアミダイト法による合成サイクルを自動で繰り返す装置です。担体に結合した5'末端の脱トリチル化(脱保護)、アミダイトとアクチベーターによるカップリング、未反応末端のキャッピング、亜リン酸トリエステルの酸化または硫化を1サイクルとし、目的長まで伸長します。試薬の送液・反応時間・洗浄を機械が制御することで、長鎖でも再現性の高い合成ができます。

選定軸はスケール、カラム(反応容器)数、カップリング効率、収率、GMP対応です。スケールはnmol〜μmol級の研究用から、数十mmol〜mol級の製造用まで幅があり、目的の必要量とコストで決まります。1残基ごとのカップリング効率は最終収率を左右し、長鎖ASO/siRNAでは99%以上が求められます。トリチルモニタリングで各サイクルの進行を確認できる機種もあります。

工程設計では、ホスホロチオエート化(硫化)の有無、2'修飾アミダイトやLNA/MOEなどの特殊モノマー対応、デリバリー方式(流路式か反応容器式か)、試薬消費量、スケールアップの連続性を考慮します。製造用途では21 CFR Part 11対応や記録性、洗浄バリデーション、原材料トレーサビリティが重要になります。