製品ガイド・残存Protein A ELISA（Protein Aリーク）

残存Protein A ELISA

残存Protein A ELISAは、アフィニティ精製でカラムから抗体・Fc融合製品にリークしたProtein Aリガンドの残存量を、サンドイッチELISAでppm（ng/mg）オーダーに定量するCQA分析である。

主な用途: 残存Protein A・Protein Aリーク・ELISAキット・アフィニティ精製・CQA分析

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掲載メーカー5社Cygnus Technologies・Repligen・Bio-Techne / R&D Systems ほか

掲載製品5製品各社の公式ページへのリンク付き

使う工程4工程Protein A捕捉・溶出評価・中間精製（CEX/AEX）・ポリッシュ／最終精製

関連モダリティ6種抗体医薬（mAb）・Fc融合・組換えタンパク質・二重特異性抗体

要点

樹脂銘柄（天然/組換え/MabSelect SuRe/PrismA/改変）に標準品・抗体を一致させる
汎用キットは改変アルカリ耐性リガンドを過小評価する恐れがある
前処理（加熱解離 or boiling-free変性）でIgG結合リガンドを遊離させる
高IgG耐性（最大20mg/mL程度）でppm域のLLOQを確保

メーカーと製品

5社・5製品

Cygnus TechnologiesProtein A ELISA Kit (F400 / F050H / Mix-N-Go F600 シリーズ)Protein A精製で抗体製品にリークした天然・組換えProtein Aリガンドの残存量をサンドイッチELISAで定量公式サイト

RepligenProtein A ELISA Kit (9000-1) / MabSelect SuRe ELISA Kit (9333-1)mAb・Fc融合タンパク製品中の残存Protein A（天然・組換え・MabSelect SuReリガンド）を高感度に定量公式サイト

Bio-Techne / R&D SystemsProtein A ELISA Kit (BPPA00) / Protein A ELISA Kit for Engineered Variant (BPPAEV0)治療用mAb製造工程でカラムからリークした天然・組換え・改変Protein A（MabSelect SuRe等）残存量を測定公式サイト

Rockland ImmunochemicalsPrismA ELISA Kit（残存Protein Aリガンド検出）Cytiva MabSelect PrismA樹脂由来の残存PrismAリガンドリークを高IgG耐性・高感度に定量公式サイト

ACROBiosystemsresDetect Universal Protein A Quick ELISA Kit (Boiling-free)加熱前処理不要で抗体製品中の残存Protein Aリガンドを迅速に定量するユニバーサルELISAキット公式サイト

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用途・特徴

安全性・免疫原性に関わるプロセス関連不純物として原薬規格で管理される。選定の核心は、樹脂銘柄ごとに異なるリガンド（天然・組換え・MabSelect SuRe・PrismA・改変変異体）に標準品と抗体を一致させ、製品IgGに結合したリガンドを前処理で解離させる点にある。

残存Protein A ELISAは、固相化した抗Protein A抗体と酵素標識抗体によるサンドイッチ形式で、製品中にリークしたリガンドをng/mL（最終的にはng/mg＝ppm）で定量する。汎用ELISAページと根本的に異なるのは、検出対象が「リガンドの種類」で分かれる点である。天然Protein A、組換えProtein A、そしてMabSelect SuRe・PrismAのようなアルカリ耐性の改変Bドメイン多量体では抗原のエピトープが異なり、汎用キットでは改変リガンドを過小評価する。樹脂銘柄に対応した標準品・抗体を選ばないと数値の意味が成立しない。

残存Protein A特有の難所は、リークしたリガンドの多くが製品IgGのFc／Fab領域に結合して「隠れる」ことである。そのため多くのキットは加熱（boiling）または酸・変性試薬による前処理でリガンドを解離させ、複合体を壊してから測定する。前処理の有無・方式（加熱／boiling-free）はキット選定の決定要素であり、HCP ELISAなど他の残存物アッセイには存在しない固有工程である。前処理条件が合わないと回収率が大きく振れる。

もう一つの軸が高IgG耐性である。Protein A精製の溶出画分は数〜20mg/mLのIgGを含み、これが非特異反応やマトリックス干渉を起こす。リガンドはppm（IgG 1mgあたりng）オーダーで管理するため、高濃度IgG共存下でも0.1〜数ng/mLのLLOQを保てるかが要点になる。樹脂銘柄一致・前処理方式・IgG耐性の三軸が、汎用ページでは束ねきれない選定の中核である。

使用方法

下表はProtein A捕捉以降のサンプル（溶出画分〜原薬）の残存リガンドを定量する標準的なELISAの流れ。使用樹脂の銘柄に一致した標準品・抗体と、検証済みの前処理条件に揃える。

1樹脂銘柄に一致した標準品・キット選定

2前処理（加熱解離 or boiling-free）でリガンド遊離

3標準品・試料の希釈調製

4捕捉抗体プレート反応・洗浄・検出抗体反応

5基質発色・吸光度測定（プレートリーダー）

6標準曲線で内挿・ng/mg換算・規格判定

前処理（加熱／変性）はIgGに結合したリガンドを解離させる必須工程で、条件が外れると回収率が大きく振れる。希釈直線性が崩れる希釈点（高IgG由来の干渉やフック効果）は判定から除外し、直線域内で報告する。スパイク回収・システム適合性が基準を外れたランは再試験とする。

掲載情報の確認日：2026年7月（メーカー公開情報をもとに編集部が確認。最新・正確な仕様は各社公式をご確認ください）

残存Protein A ELISA