製品ガイド・クロマトグラフィー

分取SECクロマト担体（メディア）

分取SECクロマト担体（サイズ排除メディア）は、孔径が制御された多孔質粒子で分子を流体力学的サイズの違いにより分離する分取用の担体です。

主な用途: サイズ排除分離・バッファー交換・凝集体除去・最終ポリッシュ・分画範囲

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掲載メーカー6社Cytiva・Tosoh Bioscience・Bio-Rad ほか

掲載製品6製品各社の公式ページへのリンク付き

使う工程5工程バッファー交換・脱塩・凝集体・サイズ分離・最終ポリッシュ

関連モダリティ5種ウイルスベクター（AAV/レンチ）・抗体医薬・組換えタンパク質・酵素

要点

孔径に基づき分子を流体力学的サイズで分離する担体
結合・溶出を伴わないアイソクラティック運転で穏やか
バッファー交換・脱塩（グループ分離）に広く使える
凝集体（HMW）・断片（LMW）をモノマーから分離できる

メーカーと製品

6社・6製品

CytivaSuperdex / Sephacryl / Sephadex G高分解能分取のSuperdex、広範囲のSephacryl、脱塩のSephadex Gと用途別に分画範囲を選べる定番SEC担体。公式サイト

Tosoh BioscienceTOYOPEARL HW シリーズメタクリレート系の分取SEC担体。HW-40〜HW-75まで分画範囲を選び、脱塩からタンパク質分離まで対応。公式サイト

Bio-RadBio-Gel P / ENrich SECポリアクリルアミド系Bio-Gel Pと高分解能のENrich SECを揃え、脱塩・分取用途に使われる。公式サイト

Merck / MilliporeSigmaFractogel / TSKgel SEC mediaFractogel系やTSKgel系のサイズ排除メディア。タンパク質のサイズ分離・バッファ交換に使われる。公式サイト

SartoriusSEC Chromatography Resinsサイズ排除用のクロマトグラフィー担体群。ポリッシュやバッファ交換の選定候補になる。公式サイト

RepligenOPUS Pre-packed SEC Columns各種SEC担体を充填するカスタムプレパックカラム。開発からGMP規模まで脱塩・分取に使われる。公式サイト

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用途・特徴

ウイルスベクターやタンパク質のバッファー交換（脱塩）、凝集体・サイズ分離、最終ポリッシュに使われ、分画範囲と運転流速が選定の中心軸になります。グラジエント不要で穏やかな分離ができ、回収率や活性維持を重視する工程で重宝されます。

分取SEC担体は、孔径が制御された多孔質粒子に移動相を流し、分子を大きさの順に分離します。大きい分子ほど粒子内の孔に入りにくく早く溶出し、小さい分子ほど遅れて溶出します。結合・溶出を伴わないアイソクラティック運転のため、塩やpHのグラジエントが不要で、目的物を穏やかに分離でき、活性や構造を保ちやすいのが特徴です。

選定の中心軸は分画範囲（粒子の孔径に対応する分子量域）と粒子径・流速です。脱塩・バッファー交換にはグループ分離型（小孔・粗粒子・高流量）、凝集体やサイズ分離には高分解能型（適合する分画範囲・小粒子）を選びます。粒子径が小さいほど分離能は上がりますが背圧が高く流速を抑える必要があり、生産性とのトレードオフになります。

工程設計では、サンプル負荷量がカラム体積の数%に制限される点、希釈が起こる点を踏まえてスケールとサイクルを設計します。あわせて、1mol/L NaOHでのCIP（アルカリ耐性）、圧力-流速特性、寿命、プレパックカラムの可否、ベースマトリックスの機械的強度、供給安定性を確認します。

使用方法

基本的には、目的（脱塩か高分解能分離か）に合う分画範囲の担体を選び、平衡化したカラムにサンプル体積を絞ってロードし、アイソクラティックに溶出してサイズ順に分画・回収します。

1分画範囲・粒子径と運転流速を選定する

2ランニングバッファーでカラムを平衡化する

3サンプルをカラム体積の数%に絞ってロードする

4一定流速でアイソクラティック溶出し主ピークを分画する

5凝集体・回収率・バッファー組成を確認する

61mol/L NaOH等でCIP・サニタイズし保存する

実際の運転条件は、目的物のサイズと不純物プロファイル、担体の分画範囲・粒子径、サンプル負荷量、流速、カラム長・スケール、GMP要件によって変わります。脱塩用途では分離能より流速・容量を、高分解能分離では分画範囲の適合と低流速運転を優先します。

分取SECクロマト担体（メディア）