細胞株開発・クローン選抜
トランスフェクション後培養、単一細胞播種、クローン増殖確認に使われる。
- クローン培養
CO2インキュベーターは、細胞を一定の温度、CO2濃度、湿度で培養するための装置です。哺乳類細胞の培養では、一般的に37℃、5% CO2、高湿度環境が使われます。CO2は培地中の重炭酸バッファー系と関係しており、培地pHを安定させるために重要です。温度やCO2濃度が不安定になると、細胞増殖、細胞生存率、タンパク質発現、分化状態、代謝状態に影響します。
CO2インキュベーターは、細胞を培養するための安定した環境を作る装置です。主に、哺乳類細胞、CHO細胞、HEK293細胞、T細胞、NK細胞、iPS細胞、MSC、初代細胞、がん細胞、ハイブリドーマなどの培養に使われます。抗体医薬では、細胞株開発、セルバンク融解後の回復培養、シードトレイン、分析用細胞の維持に関係します。
細胞培養では、温度、CO2、湿度、清浄性が崩れると、細胞状態が変わります。特にシードトレインでは、本培養へ渡す細胞状態を安定させる必要があるため、CO2インキュベーターの安定性は重要です。
基本的には、CO2インキュベーターを設定温度とCO2濃度に安定させ、培養容器を庫内に入れて細胞を培養します。
ウォーターバスとCO2インキュベーターは、どちらも温度管理に関係しますが、役割は大きく異なります。
ウォーターバスは「サンプルを温める装置」、CO2インキュベーターは「細胞を培養する装置」です。
チューブ、バイアル、試薬、サンプル
細胞培養容器
短時間の加温・融解
細胞を一定環境で培養する
水を介して速い
空気を介して穏やか
なし
あり
なし
あり
凍結細胞融解、試薬予温、酵素反応
回復培養、継代培養、シードトレイン
水質・清掃・汚染対策
CO2濃度、湿度、庫内清浄性
| 項目 | CO2インキュベーター | CO2シェーカー |
|---|---|---|
| 培養方式 | 静置培養 | 振とう培養 |
| 主な容器 | フラスコ、プレート、ディッシュ | シェイクフラスコ、バッグ、一部チューブ |
| 主な細胞 | 接着細胞、静置培養細胞、プレート培養 | 浮遊細胞、CHO、HEK293など |
| 用途 | 回復培養、継代、単一細胞培養、細胞治療 | シードトレイン、拡大培養、浮遊細胞培養 |
| 撹拌 | なし | あり |
| スケールアップ | 静置系中心 | フラスコからリアクターへ接続しやすい |
| 注意点 | 庫内環境とコンタミ管理 | 振とう条件、酸素移動、せん断、フラスコ容量 |
| 項目 | CO2インキュベーター | マルチガスインキュベーター |
|---|---|---|
| 制御項目 | 温度、CO2、湿度 | 温度、CO2、O2、湿度 |
| 主な用途 | 一般的な細胞培養 | 低酸素培養、幹細胞、がん、初代細胞 |
| O2制御 | なし | あり |
| ガス | CO2 | CO2、N2、場合によりO2 |
| 向く細胞 | CHO、HEK293、一般細胞 | iPS、MSC、初代細胞、がん細胞、低酸素モデル |
| 注意点 | CO2校正、湿度管理 | O2センサー、N2消費量、低酸素条件の再現性 |
| タイプ | 内容 | 向く用途 |
|---|---|---|
| 標準CO2インキュベーター | 温度・CO2・湿度を制御する基本タイプ | 一般的な細胞培養 |
| コンパクトCO2インキュベーター | 小容量・省スペース型 | 少量サンプル、個別培養、専用用途 |
| 大容量CO2インキュベーター | 多数のフラスコやプレートを収容できる | 多検体、細胞株開発、QC |
| スタック対応型 | 2段積みなどに対応する | ラボスペース節約 |
| 高温除染対応型 | 180℃などの高温除染に対応する | コンタミ対策、GMP寄り運用 |
| UV除染対応型 | UV照射機能を備える | 庫内清浄性の維持 |
| 銅チャンバー型 | 銅の抗菌性を活かした庫内構造 | コンタミリスク低減 |
| HEPAフィルター搭載型 | 庫内空気を清浄化する | 清浄性重視の培養 |
| マルチガス型 | CO2に加えO2も制御する | 低酸素培養、幹細胞、細胞治療 |
| GMP対応・記録強化型 | アラーム、ログ、通信、校正、記録性を重視 | 製造、品質管理、細胞治療 |
CO2インキュベーターは、細胞培養が関係する多くの工程で使われます。
トランスフェクション後培養、単一細胞播種、クローン増殖確認に使われる。
遺伝子導入後の細胞培養や選択培養に使われる。
単一細胞分注後のプレート培養に使われる。
ウェル内の細胞増殖を安定環境で維持する。
MCB/WCB評価用細胞の回復培養、確認培養に使われる。
WCB融解後の回復培養、初期段階の培養に使われる。
解凍後の細胞を回復させる工程で使われる。
Tフラスコ、培養プレート、静置系容器での拡大に使われる。
原料細胞、中間細胞、分化細胞の培養に使われる。
iPS細胞、MSC、分化細胞の培養に使われる。
細胞ベースアッセイ、バイオアッセイ、毒性評価で使われる。
一般的な細胞培養、細胞維持、試験培養に使われる。
CO2インキュベーターは、細胞培養が関係する多くのモダリティーで使われます。