プロテロメラーゼ（TelN・末端閉環酵素）

プロテロメラーゼ（テロメアリゾルバーゼ）は、ファージや細菌に由来する末端結合酵素です。代表的なTelN（ファージN15由来）は、dsDNA中の約56 bpの認識配列（telRL）でチロシン介在型の切断を行い、切断端を共有結合で閉じたヘアピン構造に変換します。この反応により、両端が閉じた直鎖状DNA（doggybone/dbDNA）が得られます。

dbDNA合成の典型的なワークフローでは、環状鋳型をRCA（phi29ポリメラーゼ）で増幅して直鎖状コンカテマーを生成し、そこに含まれる認識配列をプロテロメラーゼで切断・閉環します。閉端はエキソヌクレアーゼ耐性を持つため、開放端を持つ副産物や未反応鎖を後段の消化・精製で選択的に除去できます。

供給元は限られるニッチな酵素です。New England BiolabsがEnClose製品ラインとしてTelN／TelAプロテロメラーゼおよびセルフリーdbDNA合成キットを提供し、Touchlightは自社dbDNAプラットフォーム上で独自に用いる受託形態をとります。性能や仕様は各メーカーの公表情報に基づく点にご留意ください。