抗体スクリーニング
抗原結合性や親和性の確認に使われます。
主な用途
- 抗原結合性の確認
- 親和性の評価
- エピトープビニング
Product Guide
SPR（表面プラズモン共鳴）
SPRは、センサーチップ表面で起こる分子間相互作用を、ラベルフリーでリアルタイムに測定する方法です。 流路を通してサンプルをセンサーチップ上に流し、結合に伴うシグナル変化を測定します。詳細な速度論解析や親和性評価に強い方法です。
用途・特徴
SPRは、抗体やタンパク質、低分子などの相互作用をリアルタイムで測定するために使われます。
抗体候補の親和性評価、結合速度解析、エピトープビニング、抗体と抗原の結合確認、Fc受容体との結合評価、低分子スクリーニングなどに使われます。
Point
- ラベルフリーで分子間相互作用を測定できる
- 結合速度・解離速度・親和性を解析できる
- 抗体候補の詳細な結合評価に使われる
- 低分子からタンパク質まで幅広い相互作用に対応する
- センサーチップ・固定化条件・再生条件の検討が重要
使用方法
基本的には、センサーチップ上にリガンドとなる分子を固定化し、アナライトを流路から流して結合・解離を測定します。
1センサーチップを準備する
2リガンドを固定化する
3ベースラインを取得する
4サンプルを流す
5結合シグナルを測定する
6解離を測定する
7表面を再生する
8濃度系列を測定する
9速度論・親和性を解析する
抗体評価では、抗原を固定化して抗体を流す方法、抗体を捕捉して抗原を流す方法、Protein A/Gや抗Fc抗体で抗体を捕捉する方法などがあります。 実際の条件は、固定化方法、チップ種類、バッファ、流速、温度、濃度系列、再生条件、非特異吸着の有無によって変わります。
BLIとの違いは？
SPRとBLIは、どちらもラベルフリーで分子間相互作用を測定する方法です。測定原理とサンプルの供給方法が異なり、得意な場面も変わります。
主な原理
センサー先端の干渉パターン変化を測定する
センサーチップ表面の屈折率変化を測定する
サンプル供給
センサーをサンプルに浸す
流路でサンプルを流す
強み
多検体スクリーニングや培養上清測定に使いやすい
詳細な速度論解析・低分子相互作用・高感度解析に強い
注意点
センサー選択・サンプル蒸発・振とう条件に注意
流路・チップ・固定化条件・再生条件の管理が重要
主な用途
抗体濃度測定・スクリーニング・エピトープビニング
親和性解析・結合速度解析・低分子スクリーニング
サンプル
粗サンプルにも使いやすい場合がある
精製サンプルでの詳細解析に向く
SPRは「詳細な相互作用解析に強い装置」、BLIは「多検体・簡便なラベルフリー測定に強い装置」と考えるとわかりやすくなります。
使用される工程
SPRは、抗体やタンパク質の詳細な結合評価が必要な複数の工程で使われます。
産生量スクリーニング
候補抗体の結合確認や濃度測定に使われる場合があります。
主な用途
- 結合確認
- 濃度測定
- 候補の比較
細胞株開発・クローン選抜
候補クローン由来抗体の結合活性確認に使われます。
主な用途
- 結合活性の確認
- クローン比較
- 候補の絞り込み
品質評価・分析
結合活性・力価・Fc受容体結合などの評価に使われます。
主な用途
- 結合活性
- 力価
- Fc受容体結合
創薬研究
抗体・タンパク質・低分子・受容体リガンドの相互作用解析に使われます。
主な用途
- 相互作用解析
- 低分子スクリーニング
- リガンド評価
プロセス開発
精製前後の結合活性やサンプル品質確認に使われる場合があります。
主な用途
- 精製前後の比較
- 結合活性の確認
- サンプル品質確認
使用されるモダリティー
SPRは、分子間相互作用の詳細解析が必要なモダリティーで使われます。関連度は、そのモダリティーでの使われ方の深さの目安です。
抗体医薬
関連度高
抗原結合親和性エピトープビニングFc受容体結合
抗体候補の詳細な結合評価に使われる。
二重特異性抗体
関連度高
2標的結合順次結合結合競合の確認
複数標的への結合評価に使われる。
Fc融合・組換えタンパク質
関連度高
受容体結合リガンド結合親和性解析
タンパク質間相互作用の評価に使われる。
ワクチン
関連度中〜高
抗原抗体反応免疫応答評価
抗原設計や抗体応答の解析に使われる。
低分子医薬品
関連度高
ターゲット結合フラグメントスクリーニング
低分子とタンパク質の相互作用解析に使われる。
ウイルスベクター
関連度中
カプシド受容体抗体との相互作用
研究・品質評価の一部で使われる。
mRNA医薬・LNP
関連度中
発現タンパク質の結合評価抗原評価
発現産物や抗原の機能確認に使われる。
細胞治療・再生医療
関連度低〜中
分泌因子受容体リガンド評価
製品そのものより評価系で使われる。
メーカー製品
CytivaBiacore 8K / 8K+高スループットなSPR解析に対応するBiacoreシリーズ。抗体スクリーニング、キャラクタリゼーション、品質管理に使われる。公式URL CytivaBiacore T200親和性解析、速度論解析、濃度測定などに使われる汎用性の高いSPRシステム。公式URL CytivaBiacore 1K / 1K+ / 1S+比較的小規模な相互作用解析や多ユーザー環境で使いやすいSPRシステム。公式URL Bruker / CarterraCarterra LSA高スループットSPRに対応するプラットフォーム。抗体スクリーニングやエピトープビニングに使われる。公式URL BrukerSierra SPRシリーズSPRを用いたラベルフリー相互作用解析装置。低分子やタンパク質相互作用の解析に使われる。公式URL NicoyaOpenSPR / Altoベンチトップ型やデジタルマイクロ流体を使ったSPRシステム。研究用途の相互作用解析に使われる。公式URL ReichertReichert SPR Systemsラベルフリー相互作用解析に使われるSPR装置。タンパク質、抗体、低分子の解析に対応する。公式URL
