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分析 ・ 細胞・遺伝子・ウイルスベクター

フローサイトメトリーによる細胞特性解析とは？

フローサイトメトリーは、細胞を1個ずつ蛍光標識で測定し、表現型・純度・マーカー発現を評価する手法です。

代表的な方法
多色フローサイトメトリーによる表面/細胞内マーカー定量（CAR発現率・サブセット純度・生細胞率を含む）
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フロー特性解析が要る理由

この試験を受ける会社・キット

12社
PromegaGenePrint 10 Systemヒト細胞株の同一性確認と同種内交差汚染の検出に使われるSTR解析キット。10ローカスを共増幅。公式サイト
PromegaPowerPlex 16 HS System15 STRローカスとAmelogeninを共増幅するSTR解析キット。細胞株認証や個体識別系の解析に。公式サイト
Thermo Fisher Scientific / Applied BiosystemsAmpFLSTR Identifiler Plus PCR Amplification Kit15常染色体STRローカスとAmelogeninを解析するSTR解析キット。公式サイト
Thermo Fisher Scientific / Applied BiosystemsGlobalFiler / GeneMapper関連多ローカスSTR解析用PCRキットやフラグメント解析ソフトウェア群。公式サイト
QIAGENInvestigator STR KitsSTR解析用キット。フラグメント解析や個体識別、細胞由来確認に使われる。公式サイト
BiotypeMentype Cell Line Authentication Kit細胞株認証向けSTR解析キット。ヒト細胞株の同一性確認に使われる。公式サイト
Thermo Fisher Scientific / Applied BiosystemsSeqStudio Genetic Analyzerキャピラリー電気泳動によるSangerシーケンス、フラグメント解析に対応。STR解析に使われる。公式サイト
Thermo Fisher Scientific / Applied Biosystems3500 Genetic Analyzerキャピラリー電気泳動装置。フラグメント解析、STR解析、Sangerシーケンスに使われる。公式サイト
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PromegaSpectrum Compact CE Systemキャピラリー電気泳動によるフラグメント解析装置。STR解析、Sangerシーケンスに使われる。公式サイト
QIAGENQIAxcel Advanced Systemキャピラリー電気泳動ベースの核酸解析装置。PCR産物確認やフラグメント解析に使われる。公式サイト
Charles RiverCell Line Characterization細胞同一性、種確認、ウイルス安全性などと組み合わせて使われる細胞株特性解析サービス。公式サイト
Eurofins BioPharma Product TestingCell Bank Characterizationセルバンク特性解析の一部として、細胞同一性、純度、安全性評価に対応。公式サイト
Merck / BioRelianceCell Line Characterization / Contract Testingセルバンク特性解析、細胞株同一性、安全性試験などに対応する受託試験サービス。公式サイト
SGSCell/Virus Bank CharacterizationRCB、MCB、WCBなどの細胞・ウイルスバンク特性解析。細胞同一性や安全性評価に関係する。公式サイト
WuXi BiologicsBiosafety / Cell Line Characterizationセルバンク特性解析、バイオセーフティ、製造細胞株評価に対応。公式サイト
Thermo Fisher ScientificKaryoStat / Cytogenetics関連製品染色体解析、コピー数変化、核型評価に関係する製品群。幹細胞や細胞株解析で使われる。公式サイト
Applied StemCellKaryotyping ServicesiPS細胞、ES細胞、細胞株などの核型解析サービス。公式サイト
WiCellStem Cell Characterization / Karyotyping幹細胞の品質評価、核型解析、細胞認証に関係するサービス。公式サイト
Creative BioarrayKaryotyping Service細胞株、幹細胞、研究用サンプルの核型解析サービス。公式サイト
103社分析・品質試験を受ける受託企業を探すメーカー・受託先企業のページで細胞治療の分析・品質試験を受ける会社を絞り込めます
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CAR発現率、細胞のサブセット純度、iPS/幹細胞の多能性・分化マーカーなど、細胞治療の特性解析の中心になります。

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手法の比較 ― どの方法で測るか

手法原理何が分かる使い分け
多色フローサイトメトリー表面マーカーを多色蛍光で同時測定表現型・純度・CAR発現率・CD73/90/105特性解析の主力
細胞内染色フロー固定・透過後に細胞内分子を染色多能性マーカー・分化マーカーiPS/分化細胞の評価
セルソーティング目的細胞を分取純化・単一集団化サブセット分離
スペクトルフローサイトメトリー（フルスペクトル・unmixing）各蛍光色素の全発光スペクトルを取得し、参照スペクトルでアンミキシングして30色超を同時解析高次元の表現型（多能性・分化・サブセット・活性化マーカーを一括）既存表の多色フローを高色数化。自家蛍光分離やCAR-T/iPS製品の網羅的特性解析に有用
定量フローサイトメトリー（MESF/ABC標準化）標準ビーズ（MESF・抗体結合能ABC）で蛍光を分子数換算し、機器/日間で比較可能な絶対値に標準化抗原発現量・CAR密度の定量化、機器間互換性%（陽性率）に加え発現量の絶対定量を補い、規格の機器間移管・経時管理を支える
イメージングフローサイトメトリーフロー測定に各細胞の明視野/蛍光画像を組合せ、局在・形態・共発現を1細胞単位で評価マーカー局在（核/膜/細胞質）、内在化、細胞-細胞結合の有無細胞内染色フローを画像情報で補強。doublet/凝集の判別やシナプス・局在確認に有用