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フローサイトメトリーによる細胞特性解析とは？
フローサイトメトリーは、細胞を1個ずつ蛍光標識で測定し、表現型・純度・マーカー発現を評価する手法です。CAR発現率、細胞のサブセット純度、iPS/幹細胞の多能性・分化マーカーなど、細胞治療の特性解析の中心になります。
フロー特性解析が要る理由
細胞集団の不均一性を単一細胞で捉える
同一性・純度・効力に直結する指標を測れる
ゲーティング・パネル設計で結果が変わる
手法の比較 ― どの方法で測るか
| 手法 | 原理 | 何が分かる | 使い分け |
|---|---|---|---|
| 多色フローサイトメトリー | 表面マーカーを多色蛍光で同時測定 | 表現型・純度・CAR発現率・CD73/90/105 | 特性解析の主力 |
| 細胞内染色フロー | 固定・透過後に細胞内分子を染色 | 多能性マーカー・分化マーカー | iPS/分化細胞の評価 |
| セルソーティング | 目的細胞を分取 | 純化・単一集団化 | サブセット分離 |
こんな場面で使う
- CAR発現率・形質導入率の確認
- 細胞純度・サブセット比の評価
- 多能性・分化マーカーの確認
主な測定項目
- CAR/導入遺伝子発現率（%）
- 目的細胞の純度（%）
- マーカー陽性率（%）
関連分析とのつながり
フロー特性解析のポイント
パネル設計・蛍光補正（コンペンセーション）を最適化する
ゲーティング戦略を標準化する
生存率・死細胞除去を適切に行う
アイソタイプ/FMO対照を設定する
機器間差・日内差を標準ビーズで管理する
規格としての陽性率・純度を設定する
