細胞株開発・クローン選抜
目的分子発現、蛍光レポーター、細胞状態の確認に使われます。
主な用途
- 発現確認
- 蛍光レポーター
- 細胞状態確認
Product Guide
フローサイトメトリー
フローサイトメトリーは、細胞を流路に流し、レーザー光を照射して散乱光や蛍光シグナルを測定する分析方法です。細胞表面マーカー、細胞内タンパク質、細胞周期、細胞死、蛍光レポーターなどを、細胞集団の中で1細胞単位に解析できます。
用途・特徴
フローサイトメトリーは、細胞集団の中にどのような細胞がどれくらいいるかを解析するために使われます。
蛍光標識抗体や蛍光タンパク質を使うことで複数のマーカーを同時に測定でき、細胞を1個ずつ流すため、平均値だけでなく細胞集団のばらつきやサブポピュレーションも確認できます。
Point
- 1細胞単位で細胞集団を解析できる
- 複数マーカーを同時に測定できる
- 生細胞・死細胞、細胞周期、表面マーカーなどを評価できる
- 細胞株開発や抗体スクリーニングにも使われる
使用方法
基本的には、細胞懸濁液を調製し、必要に応じて蛍光標識抗体や染色試薬で染色したうえで装置にセットします。
1細胞を回収する
2単一細胞懸濁液を調製する
3抗体・蛍光染色を行う
4洗浄する
5装置にセットする
6散乱光・蛍光を測定する
7ゲーティングを行う
8目的細胞集団を解析する
9次の培養・評価へ進む
実際の条件は、細胞種、染色パネル、蛍光色素、レーザー構成、検出器、補償、スペクトルアンミキシング、ゲーティング設計によって変わります。
セルソーターとの違いは？
フローサイトメトリーとセルソーターは、どちらも細胞を流路に流して散乱光や蛍光シグナルを測定する技術です。大きな違いは、解析だけで終わるか、目的細胞を分取・回収できるかです。
主な目的
目的細胞を分取・回収する
細胞集団を解析する
細胞の回収
チューブやプレートへ回収できる
基本的には回収しない
単一細胞化
1細胞ずつウェルへ分取できる
解析が中心
主な用途
単一細胞化、目的細胞分取、抗体産生細胞の選別
免疫解析、細胞表現型解析、品質確認
注意点
ソーティング条件、細胞ダメージ、バイオセーフティに注意
パネル設計、補償、ゲーティングに注意
フローサイトメトリーは「見る装置」、セルソーターは「見て選んで回収する装置」と考えるとわかりやすくなります。
使用される工程
フローサイトメトリーは、細胞を解析する複数の工程で使われます。
細胞状態・増殖評価
生死細胞、アポトーシス、細胞周期、ばらつき確認に使われます。
主な用途
- 生死判定
- 細胞周期
- アポトーシス
抗体スクリーニング
抗原結合細胞や抗体産生細胞の評価に使われます。
主な用途
- 抗原結合細胞
- 抗体産生細胞
- 候補評価
セルバンク
細胞同一性や細胞集団の確認に使われる場合があります。
主な用途
- 細胞同一性
- 細胞集団確認
- 品質確認
細胞治療・再生医療
目的細胞集団、純度、分化マーカー、安全性確認に使われます。
主な用途
- 純度確認
- 分化マーカー
- 安全性確認
品質評価・分析
細胞表現型、細胞集団、機能評価に使われます。
主な用途
- 表現型
- 細胞集団
- 機能評価
使用されるモダリティー
フローサイトメトリーは、細胞そのものを評価するモダリティーで特に重要です。
抗体医薬
関連度中〜高
細胞株開発抗体スクリーニング細胞ベース評価
発現確認や抗体結合評価に使われる。
二重特異性抗体
関連度高
標的細胞結合免疫細胞活性化細胞ベースアッセイ
複数細胞集団への結合確認に使われる。
Fc融合・組換えタンパク質
関連度中
受容体発現結合評価細胞応答評価
細胞表面標的の評価に使われる。
細胞治療・再生医療
関連度高
細胞集団の同定純度分化マーカー品質確認
製品細胞の表現型確認に重要。
iPS細胞・幹細胞由来製品
関連度高
分化マーカー未分化細胞目的細胞集団確認
分化状態や不要細胞の確認に使われる。
ウイルスベクター
関連度中〜高
トランスダクション効率発現確認
蛍光レポーターや細胞表面マーカーで確認する。
ワクチン
関連度中
免疫応答抗原提示細胞性免疫評価
免疫細胞解析で使われる。
mRNA医薬・LNP
関連度中
発現細胞確認細胞応答免疫細胞解析
発現確認や細胞応答評価で使われる。
低分子医薬品
関連度中
細胞周期アポトーシス毒性評価
創薬評価系で使われる。
メーカー製品
BD BiosciencesBD FACSymphony A5 SE Cell Analyzerスペクトル解析と従来型フロー解析に対応する高パラメーターフローサイトメーター。多色解析や高次元解析に使われる。公式URL BD BiosciencesBD FACSLyric Flow Cytometer日常的なフローサイトメトリー解析に使われる装置。細胞表現型解析や多色測定に対応する。公式URL Beckman Coulter Life SciencesCytoFLEX Flow Cytometer卓上型フローサイトメーター。研究用の多色解析や細胞集団解析に使われる。公式URL Thermo Fisher Scientific / InvitrogenAttune CytPix Flow Cytometer音響フォーカシングと明視野カメラを組み合わせ、フロー解析と画像情報を同時に扱える装置。公式URL Thermo Fisher Scientific / InvitrogenAttune NxT Flow Cytometer高速サンプル取得とマルチカラー解析に対応するフローサイトメーター。公式URL Cytek BiosciencesCytek Auroraフルスペクトラムプロファイリング技術を用いたスペクトラルフローサイトメーター。自家蛍光の影響があるサンプルで使われる。公式URL Sony BiotechnologyID7000 Spectral Cell Analyzerスペクトラル解析に対応するセルアナライザー。高多色パネルや複雑な細胞集団解析に使われる。公式URL Miltenyi BiotecMACSQuant Analyzerフローサイトメトリー解析に対応するベンチトップ型装置。細胞解析や免疫細胞評価に使われる。公式URL
