用語集
「ハイブリダイゼーション」とは？
別名・英語表記：hybridization ／ ハイブリダイズ
相補的な塩基配列を持つ核酸鎖同士が水素結合して二重鎖を形成する反応。
別名・英語表記：hybridization ／ ハイブリダイズ
相補的な塩基配列を持つ核酸鎖同士が水素結合して二重鎖を形成する反応。
相補的な塩基配列を持つ核酸鎖同士が水素結合によって二重鎖を形成する反応で、ワトソン・クリック塩基対合がその原理です。分析・前処理・治療標的への結合と幅広い場面で使われる一方、時間・温度・塩濃度といった条件がわずかにずれるだけで二重鎖形成の均一性が崩れ、回収率や測定値のばらつきに直結するため、条件の厳密な固定が求められます。
治療用途では、標的となるmRNAやpre-mRNAの特定領域に相補的な配列を持つ核酸鎖が、ワトソン・クリック塩基対合によってその領域にハイブリダイズします。診断・ゲノム解析の場面では、アレイCGHのように検体と参照DNAのハイブリダイゼーション強度比からゲノム全域のコピー数を読む手法や、ビオチン標識DNAプローブをmRNAの5'末端近傍にハイブリダイズさせてRNA:DNA二重鎖を局所的に形成させる前処理にも応用されます。また、スプリント法と呼ばれる手法では、両端に相補的なDNAオリゴを橋渡しとしてハイブリダイズさせ、リガーゼで核酸鎖を継ぐことができます。
ハイブリダイゼーションを用いたアッセイは配列特異性が高く、核酸の親分子と鎖長が短くなった代謝物（分解物）を区別して定量できる感度を持ちます。一方で、ハイブリダイズ・RNase H切断・単離といった多段の前処理を組み合わせる場合、それぞれのステップが回収率や切断位置のばらつきの要因になります。時間・温度・塩濃度などの条件を手順として固定しなければ効率値が揺れるため、プロトコールの標準化が分析の再現性を左右します。
この定義はProglenth編集部が一般的・基礎的な内容として整理したものです。実際の管理基準・要件は製品・企業・各極の規制により異なります。 正確な運用は各極の薬局方・ガイドライン（ICH／GMP等）やメーカーの一次情報をご確認ください。