細胞株開発・クローン選抜
候補クローンや培養細胞の汚染確認に使われる。
主な用途
- 候補クローン確認
- 汚染確認
汚染確認・安全性評価
マイコプラズマ試験
マイコプラズマ試験は、細胞培養においてマイコプラズマ汚染の有無を確認するための試験です。マイコプラズマは細菌よりも小さく、一般的な無菌試験では検出できない場合があります。培養細胞に感染すると、細胞増殖、代謝、遺伝子発現、タンパク質産生、品質評価結果などに影響することがあるため、細胞を扱う工程では重要な汚染確認項目になります。
- 分類
- 汚染確認・安全性評価
- 主な用途
- 汚染確認 / セルバンク品質試験 / PCR法 / 培養法
- 関連モダリティ
- 抗体医薬 / 二重特異性抗体 / Fc融合・組換えタンパク質 / ADC / AAV / レンチウイルス / 細胞治療 / iPS細胞・幹細胞由来製品 / ワクチン / mRNA医薬・LNP / 低分子医薬品
- 代表メーカー
- Thermo Fisher Scientific / Applied Biosystems・Roche Diagnostics・Bio-Rad・QIAGEN ほか計39社
- 関連キーワード
- セルバンク / MCB/WCB / 細胞株開発 / シードトレイン / 本培養 / リアルタイムPCR
用途・特徴
マイコプラズマ試験は、細胞培養の品質管理と安全性確保を目的として行われます。汚染は培地の濁りや細胞形態の変化だけでは気づきにくいため、PCR法、リアルタイムPCR法、培養法、DNA染色法、発光法、受託試験などを使い分けて確認します。
研究開発段階では迅速に確認できるPCR法や発光法が使われることが多く、GMP製造や規制対応では、薬局方やガイドラインに沿った試験法、バリデーション済みの迅速法、外部受託試験などが使われます。
Point
- 細胞培養で重要な汚染確認項目の一つ
- 一般的な無菌試験だけでは検出できない場合がある
- 細胞増殖、代謝、遺伝子発現、タンパク質産生に影響する可能性がある
- セルバンク作製時の品質試験として重要
- PCR法、培養法、DNA染色法、発光法、受託試験などがある
- GMP製造では、規制対応やバリデーションが重要になる
使用方法
一般的には、細胞培養上清や細胞懸濁液を採取し、目的に応じた試験法でマイコプラズマ汚染の有無を確認します。
1培養細胞・培養上清を採取する
2必要に応じて前処理を行う
3試験法を選択する（PCR/培養/染色/発光）
4検出キット・試薬・装置・受託を利用する
5マイコプラズマ汚染の有無を判定する
6セルバンク・工程の品質確認に利用する
実際の条件は、試験法、細胞種、サンプル量、測定目的、GMP対応の要否、バリデーション要件、試験頻度、外部委託の有無によって変わります。
PCR法と培養法の違いは？
マイコプラズマ試験には複数の方式があります。代表的なPCR法（迅速）と培養法（規制対応）を比較します。
結論
開発段階では迅速性を重視してPCR法や発光法を使い、GMPや規制対応では培養法、指標細胞を用いたDNA染色法、バリデーション済みのNAT法、受託試験などを組み合わせることがあります。
主な検出対象
生きたマイコプラズマ
マイコプラズマDNA
測定時間
数週間かかる場合がある
数時間〜1日程度
主な用途
規制対応、確認試験、薬局方試験
迅速確認、工程管理、スクリーニング
強み
古典的で規制対応に使われやすい
迅速で高感度
注意点
時間がかかる、培養できない種への対応に注意
阻害物質、偽陽性・偽陰性、バリデーションに注意
向く場面
セルバンク試験、GMP品質試験
開発段階、細胞治療、工程内管理
主な試験方式
| 試験方式 | 内容 | 向く用途 |
|---|---|---|
| リアルタイムPCR法 | マイコプラズマDNAを増幅・検出する方法 | 迅速確認、工程管理、細胞治療、バイオ医薬品製造 |
| 通常PCR法 | PCR増幅後に検出する方法 | 研究用途、スクリーニング |
| 培養法 | 液体培地・寒天培地などで培養して確認する方法 | GMP品質試験、薬局方対応 |
| DNA染色法 | Hoechstなどの蛍光染色によりマイコプラズマ由来DNAを観察する方法 | 研究用途、確認試験 |
| 発光法 | マイコプラズマ由来酵素活性などを発光で検出する方法 | 簡易スクリーニング、培養管理 |
| 受託試験 | 専門機関にサンプルを送り、規制対応試験として実施する方法 | GMP、品質保証、申請資料対応 |
使用される工程
マイコプラズマ試験は、細胞を扱う工程で広く使われます。
セルバンク
MCB、WCB作製時の品質試験として使われる。
主な用途
- MCB/WCB品質試験
- 出荷前確認
シードトレイン
培養開始前後の細胞状態確認、汚染確認に使われる。
主な用途
- 培養前後確認
- 汚染確認
本培養
工程中の異常確認、品質管理、逸脱調査に関係する。
主な用途
- 工程内確認
- 逸脱調査
細胞治療製造
原料細胞、培養細胞、最終製品の安全性確認に使われる。
主な用途
- 原料・最終製品
- 安全性確認
再生医療等製品
細胞加工工程や品質管理で使われる。
主な用途
- 細胞加工
- 品質管理
ウイルスベクター製造
Producer Cellや製造細胞の汚染確認に使われる。
主な用途
- 製造細胞確認
- 汚染確認
GMP製造
品質保証、出荷判定、規制対応試験として使われる。
主な用途
- 出荷判定
- 規制対応
各工程で広く使われる基準法・装置・試薬は、各モダリティの工程マップで製造の流れに沿って確認できます。
使用されるモダリティー
マイコプラズマ試験は、細胞を扱うモダリティーで広く使われます。
Fc融合・組換えタンパク質
関連度高
CHOHEK293などの産生細胞
産生細胞の品質確認に使われる。
ADC
関連度高
抗体原薬製造CHO細胞セルバンク
抗体部分の製造細胞管理で使われる。
AAV
関連度高
HEK293Sf9Producer Cell
ウイルスベクター製造細胞の汚染確認に使われる。
レンチウイルス
関連度高
Producer CellPackaging Cell
製造細胞の品質確認に使われる。
ワクチン
関連度中〜高
細胞基材ウイルス増殖用細胞
細胞基材の汚染確認に使われる。
mRNA医薬・LNP
関連度低〜中
評価細胞酵素・原材料製造関連
mRNA合成本体よりも関連細胞評価や原材料側で関係する。
メーカー製品
リアルタイムPCR装置（8）
Thermo Fisher Scientific / Applied BiosystemsQuantStudio Real-Time PCR Systemsマイコプラズマ検出、残存DNA、遺伝子発現解析など幅広いqPCR用途で使われるリアルタイムPCR装置。公式URL 国内取扱 サーモフィッシャーサイエンティフィック（日本法人）
Roche DiagnosticsLightCycler 480 Instrument II96/384ウェルフォーマットに対応するプレートベースのリアルタイムPCR装置。核酸検出・定量に使われる。公式URL
Bio-RadCFX Opus Real-Time PCR Systems96/384ウェルなどに対応するリアルタイムPCRシステム。研究・品質確認用途で使われる。公式URL 国内取扱 バイオ・ラッド ラボラトリーズ（日本法人）
マイコプラズマ検出キット・試薬（14）
Thermo Fisher Scientific / Applied BiosystemsMycoSEQ Mycoplasma Detection KitリアルタイムPCRベースの検出キット。バイオ医薬品・細胞培養サンプルの迅速確認に使われる。公式URL 国内取扱 サーモフィッシャーサイエンティフィック（日本法人）
Thermo Fisher Scientific / Applied BiosystemsMycoSEQ Plus Mycoplasma Detection Kitバイオプロダクションや細胞治療サンプル向けのqPCRベース検出キット。公式URL 国内取扱 サーモフィッシャーサイエンティフィック（日本法人）
SartoriusMicrosart ATMP MycoplasmaqPCRベースの迅速検出キット。ATMPや細胞治療関連サンプルの確認に使われる。公式URL 国内取扱 ザルトリウス・ジャパン（日本法人）
Merck / Sigma-AldrichLookOut Mycoplasma PCR Detection KitPCR法による検出キット。Mycoplasma、Acholeplasma、Ureaplasma汚染の確認に使われる。公式URL 国内取扱 メルク（日本法人・ライフサイエンス）
DNA染色・蛍光染色試薬（6）
Thermo Fisher Scientific / InvitrogenHoechst 33258DNA蛍光染色色素。細胞核染色やマイコプラズマDNA染色法で使われる。公式URL 国内取扱 サーモフィッシャーサイエンティフィック（日本法人）
Thermo Fisher Scientific / InvitrogenDAPIDNA染色用の蛍光色素。蛍光顕微鏡観察で使われる。公式URL 国内取扱 サーモフィッシャーサイエンティフィック（日本法人）
Merck / Sigma-AldrichHoechst 33258 / DAPIDNA染色用蛍光色素。細胞培養サンプルの蛍光観察に使われる。公式URL 国内取扱 メルク（日本法人・ライフサイエンス）
受託試験サービス（11）
Eurofins BioPharma Product TestingMycoplasma Testingバイオ医薬品、ATMP、細胞基材向けのマイコプラズマ試験。規制対応試験として利用される。公式URL
Eurofins BioPharma Product Testing KyotoBiosafety / Mycoplasma Testing国内拠点でのバイオ医薬品安全性評価。マイコプラズマ試験やウイルスクリアランス試験などに対応。公式URL
Charles River LaboratoriesMycoplasma Testing Services開発・製造段階に対応するマイコプラズマ試験サービス。各種規制要件に沿った試験に対応。公式URL
関連装置・周辺製品（9）
Thermo Fisher ScientificVarioskan / Fluoroskan / Luminoskan発光・蛍光・吸光測定に対応するプレートリーダー。発光系検出と組み合わせて使われる。公式URL 国内取扱 サーモフィッシャーサイエンティフィック（日本法人）
関連製品
関連ニュース・解説
掲載情報の確認日：2026年7月（メーカー公開情報をもとに編集部が確認。最新・正確な仕様は各社公式をご確認ください）