細胞株開発・クローン選抜
候補細胞株や製造細胞の安全性評価に関係する。
主な用途
- 細胞株評価
Product Guide
ウイルス安全性試験
ウイルス安全性試験は、細胞株、セルバンク、原材料、培養上清、中間体、最終製品などに、外来性ウイルスや潜在的なウイルス汚染がないかを確認するための試験です。in vitro/in vivo外来性ウイルス試験、種特異的ウイルスPCR、逆転写酵素活性試験、電子顕微鏡観察、NGSによる外来性ウイルス検出、ウイルスクリアランス試験などがあります。
用途・特徴
ウイルス安全性試験は、バイオ医薬品や細胞由来製品の安全性を確保するために実施されます。細胞株やセルバンクに外来性ウイルスが混入していないか、製造工程でウイルスが除去・不活化されるか、原材料や未精製バルクにウイルスリスクがないかを確認します。
Point
- セルバンク、未精製バルク、原材料、製造工程サンプルの安全性確認に使われる
- 外来性ウイルス、内在性ウイルス、種特異的ウイルスなどを評価する
- in vitro試験、in vivo試験、PCR、NGS、TEMなど複数の方法がある
- 抗体医薬、ADC、AAV、レンチウイルス、細胞治療で重要
- GMP・規制対応では、ICH Q5Aなどの考え方が関係する
- ウイルスクリアランス試験とは目的が異なるが、安全性戦略としてはセットで考える
使用方法
ウイルス安全性試験は、試験対象に応じて受託試験機関へサンプルを送付し、適切な試験法を選択して実施することが多いです。
1試験対象を決める（MCB/WCB/未精製バルク等）
2リスク評価を行う
3必要な試験法を選択する
4in vitro / in vivo / PCR / NGS / TEM 等を実施する
5結果を確認する
6規制対応・申請資料・品質保証に利用する
実際の条件は、細胞種、製造モダリティ、原材料、製造段階、規制要件、試験法、サンプル量、GMP対応、試験期間、外部委託先によって変わります。
外来性ウイルス試験とウイルスクリアランス試験の違いは？
ウイルス安全性では、この2つが混同されやすいですが、目的が異なります。
結論
外来性ウイルス試験は「ウイルスがいないかを見る試験」、ウイルスクリアランス試験は「仮にウイルスが入っても工程で除去・不活化できるかを見る試験」と考えるとわかりやすくなります。
主な目的
製造工程がウイルスを除去・不活化できるかを確認する
サンプル中にウイルス汚染がないかを確認する
主な対象
精製工程、低pH処理、ウイルスろ過、クロマト工程
セルバンク、未精製バルク、原材料、細胞基材
試験内容
モデルウイルスを添加して除去・不活化能を評価
in vitro試験、in vivo試験、PCR、NGS、TEMなど
結果の意味
工程のウイルス除去・不活化性能の確認
汚染の有無や安全性の確認
主な利用場面
工程バリデーション、申請資料、GMP製造
セルバンク特性解析、ロット試験、原材料評価
主な試験方式
| 試験方式 | 内容 | 向く用途 |
|---|---|---|
| in vitro外来性ウイルス試験 | 指標細胞に接種し、細胞変性効果・赤血球吸着などを確認する | セルバンク、未精製バルク、外来性ウイルス確認 |
| in vivo外来性ウイルス試験 | 動物や発育鶏卵などを用いて外来性ウイルスを確認する | 伝統的な規制対応試験、一部の原材料評価 |
| 種特異的ウイルスPCR | マウス、ハムスター、ウシ等に関連するウイルスをPCRで確認する | CHO細胞、動物由来原材料のリスク評価 |
| 逆転写酵素活性試験 | レトロウイルス様粒子や逆転写酵素活性を確認する | CHO細胞、ハイブリドーマ、レトロウイルス評価 |
| TEM観察 | 電子顕微鏡でウイルス様粒子を観察する | セルバンク、未精製バルク、ウイルス様粒子確認 |
| NGS/HTS外来性ウイルス検出 | 核酸を網羅的に解析し、既知・未知ウイルスを検出する | 外来性ウイルス検出、迅速法、従来法の補完・置換 |
| ウイルスクリアランス試験 | モデルウイルスを添加し、工程での除去・不活化能を評価する | Protein A、低pH不活化、ポリッシュ、ウイルスろ過 |
| 受託試験 | 外部機関にサンプルを送り、GMP対応試験として実施する | 申請資料、GMP品質試験、セルバンク特性解析 |
使用される工程
ウイルス安全性試験は、細胞由来の製造工程やバイオ医薬品製造で広く使われます。
セルバンク
MCB、WCB、EOPC/EOPCBのウイルス安全性評価に使われる。
主な用途
- MCB/WCB評価
本培養
未精製バルク、培養上清、細胞破砕液などの確認に使われる。
主な用途
- 未精製バルク確認
ハーベスト・清澄化
未精製バルク試験、工程液のウイルス安全性確認に関係する。
主な用途
- 未精製バルク試験
Protein A精製
ウイルスクリアランス試験の一部として評価される。
主な用途
- クリアランス評価
低pHウイルス不活化
抗体医薬における主要なウイルス不活化工程として評価される。
主な用途
- 不活化評価
ポリッシュ精製
AEX、CEX、HIC等のウイルス除去能評価に関係する。
主な用途
- 除去能評価
ウイルスろ過
ウイルス除去性能の評価に関係する。
主な用途
- 除去性能評価
GMP製造
品質保証、申請資料、規制対応試験として使われる。
主な用途
- 申請資料
- 規制対応
使用されるモダリティー
ウイルス安全性試験は、細胞を使うバイオ医薬品やウイルスベクター、細胞治療製品で重要になります。
抗体医薬
関連度高
CHO細胞MCB/WCB未精製バルクウイルスクリアランス
製造細胞と精製工程のウイルス安全性確認に使われる。
ADC
関連度高
抗体原薬製造CHO細胞抗体精製工程
抗体部分の製造細胞・工程安全性評価に使われる。
二重特異性抗体
関連度高
CHO細胞精製工程
基本的には抗体医薬と同様に使われる。
Fc融合・組換えタンパク質
関連度高
CHOHEK293などの産生細胞
製造細胞・未精製バルク・工程安全性確認に使われる。
AAV
関連度高
Producer Cellプラスミドウイルスベクター製造
外来性ウイルス、RCA、残存ウイルス関連評価が重要。
レンチウイルス
関連度高
Packaging CellProducer Cell
RCL、外来性ウイルス、細胞基材評価が重要。
プラスミドDNA
関連度中〜高
大腸菌製造原材料ベクター原料
原材料や製造工程のバイオセーフティ文脈で関係する。
mRNA-LNP
関連度中
原材料酵素評価細胞
mRNA合成本体よりも原材料・評価細胞・製剤側で関係する。
細胞治療
関連度高
CAR-TT細胞NK細胞MSC
原料細胞、培養細胞、最終製品の安全性確認に使われる。
iPS細胞・幹細胞由来製品
関連度高
マスターセル分化工程最終製品
細胞基盤と製造工程のウイルス安全性確認に使われる。
ワクチン
関連度高
細胞基材ウイルスシード原液最終製品
ウイルス安全性評価の中心的な対象になる。
低分子医薬品
関連度低〜中
細胞由来原材料が関係する場合
通常の化学合成品では限定的。
メーカー製品
ウイルス安全性試験・バイオセーフティ受託（12）
Charles River LaboratoriesViral Safety Testingin vitro、in vivo、分子生物学的試験、NGS、種特異的ウイルス試験などを含むウイルス安全性試験サービス。公式URL Charles River LaboratoriesCell Line Characterization製造細胞株の同一性、純度、安全性を確認する特性解析サービス。ウイルス安全性評価と組み合わせて使われる。公式URL Eurofins BioPharma Product TestingViral Safety Testingセルバンク特性解析、未精製バルク試験、ウイルス安全性評価に対応する受託試験サービス。公式URL Eurofins BioPharma Product TestingUnprocessed Bulk Testing未精製バルク試験に対応するcGMP受託試験サービス。公式URL WuXi BiologicsBiosafety Testing / Viral ClearanceCell Line Characterization、Unprocessed Bulk Testing、Viral Clearance / Viral Inactivation Studiesなどに対応。公式URL SGSBiosafety & Cell/Virus Characterizationセルバンク、ウイルスバンク、動物由来原材料、バルクハーベストなどのバイオセーフティ試験・特性解析に対応。公式URL Merck / BioRelianceBioReliance Contract Testing Servicesバイオセーフティ試験、ウイルス安全性、ウイルスクリアランス、セルバンク特性解析などの受託試験サービス。公式URL TexcellViral Safetyモノクローナル抗体、組換えタンパク質、ワクチン、遺伝子治療、細胞バンク向けのウイルス安全性試験。公式URL ViruSureBiosafety / Adventitious Agent Testingバイオ医薬品、細胞・遺伝子治療、ウイルスベクター向けの外来性因子試験、NGS、ウイルス安全性試験。公式URL Avance BiosciencesBiosafety / CMC Support Testingバイオ医薬品、細胞・遺伝子治療向けのCMC支援、外来性因子試験、NGS関連試験サービス。公式URL Nelson LabsViral Safety / Biosafety Testing医薬品、バイオ医薬品、医療機器関連のウイルス安全性・バイオセーフティ試験サービス。公式URL Bionique Testing LaboratoriesBiosafety Testing Services細胞培養、バイオ医薬品、細胞治療関連サンプル向けのバイオセーフティ試験サービス。公式URL
NGS・外来性ウイルス検出（7）
Charles River LaboratoriesNGS Testing for Adventitious Agent DetectionGMP条件下で外来性ウイルス検出や細胞株の遺伝学的特性解析に使われるNGSサービス。公式URL ViruSureNGS Testing for Adventitious Agent DetectionGMP対応のNGS外来性因子検出サービス。既知・未知のウイルス、細菌、マイコプラズマなどの検出に使われる。公式URL PathoQuestiDTECT Virome / NGS Biosafety AssaysNGSを用いたウイルス安全性試験、外来性ウイルス検出、バイオ医薬品品質試験に対応。公式URL Avance BiosciencesNGS Adventitious Agents Testing既知・未知病原体の検出に使われるNGSベースの外来性因子試験サービス。公式URL Minaris Advanced TherapiesAgentSCREEN細胞バンクや細胞由来サンプル向けのNGS外来性ウイルス検出サービス。公式URL IlluminaNextSeq / NovaSeqシリーズNGS外来性ウイルス検出、細胞株解析、ウイルス安全性評価のシーケンス基盤として使われる。公式URL Oxford Nanopore TechnologiesNanopore Sequencing Systemsロングリードシーケンスにより、ウイルス検出やゲノム解析に使われる場合がある。公式URL
PCR・種特異的ウイルス検出（6）
Thermo Fisher Scientific / Applied BiosystemsQuantStudio Real-Time PCR Systems種特異的ウイルスPCR、残存DNA、マイコプラズマ、遺伝子発現解析などに使われるqPCR装置。公式URL Roche DiagnosticsLightCycler 480 Instrument IIプレートベースのリアルタイムPCR装置。ウイルス核酸検出や定量PCRに使われる。公式URL Bio-RadCFX Opus Real-Time PCR SystemsqPCR解析、ウイルス検出、工程内確認などに使われるリアルタイムPCRシステム。公式URL QIAGENRotor-Gene Qローター型リアルタイムPCR装置。qPCR、ウイルス核酸検出、HRM解析などに対応する。公式URL Charles River LaboratoriesSpecies-specific Virus TestingMAP、HAP、RAP、9 CFR関連試験など、動物種に応じたウイルス安全性試験に対応。公式URL Merck / BioRelianceSpecies-specific Virus Testing細胞基材や動物由来原材料に関連する種特異的ウイルス試験。公式URL
ウイルスクリアランス試験サービス（5）
Charles River LaboratoriesViral Clearance Studies30年以上の実績を持つウイルスクリアランス試験サービス。工程ごとの除去・不活化能評価に対応。公式URL WuXi BiologicsViral Clearance / Viral Inactivation Studiesバイオセーフティサービスの一部として、ウイルスクリアランス、ウイルス不活化試験に対応。公式URL Eurofins BioPharma Product TestingViral Clearance Studiesバイオ医薬品製造工程のウイルスクリアランス評価に対応する受託試験サービス。公式URL TexcellViral Clearanceウイルス安全性・ウイルスクリアランス評価に対応する受託試験サービス。公式URL ViruSureViral Clearance Studiesバイオ医薬品、遺伝子治療、細胞治療向けのウイルスクリアランス試験サービス。公式URL
電子顕微鏡・逆転写酵素・関連装置（8）
JEOL透過電子顕微鏡ウイルス様粒子や細胞構造観察に使われるTEM装置。製薬QCでは受託試験として利用されることが多い。公式URL Thermo Fisher ScientificTransmission Electron MicroscopesTEM、クライオEMなどを展開。ウイルス粒子観察や構造解析に使われる。公式URL Hitachi High-Tech電子顕微鏡電子顕微鏡、分析装置を展開。ウイルス粒子観察や研究用途で利用される。公式URL SartoriusRetrovirus Detection / Microbiological Testing微生物・ウイルス安全性関連製品群。逆転写酵素活性試験など用途に応じて検討される。公式URL IlluminaNextSeq / NovaSeqシリーズNGS外来性ウイルス検出やウイルスゲノム解析のシーケンス基盤として使われる。公式URL Thermo Fisher ScientificBiosafety Cabinets / Incubators / SampleManager LIMSin vitro試験や細胞培養関連試験の周辺機器、試験データ管理のLIMSなどを展開。公式URL PHCbiCO2インキュベーター / バイオメディカル機器指標細胞を用いた培養試験や細胞培養関連試験で使われる。公式URL Esco LifesciencesBiosafety Cabinets / Cell Culture Equipment細胞培養、バイオセーフティ試験、無菌操作に関係する機器を展開。公式URL
