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mRNAのキャッピング率・ポリA長とは？
5'キャップと3'ポリAテールは、mRNAが効率よく翻訳され分解されにくくなるための必須構造です。キャップ付加率とポリA長は、mRNA医薬の効力・安定性に直結する品質特性として測定・管理します。
キャップ・ポリAを見る理由
キャップ率が翻訳効率と自然免疫回避に影響
ポリA長が安定性・翻訳に影響
共転写/酵素法で付加率が変わる
手法の比較 ― どの方法で測るか
| 手法 | 原理 | 何が分かる | 使い分け |
|---|---|---|---|
| LC-MS（キャップ） | 酵素消化後に5'末端を質量分析 | キャップ付加率・キャップ構造 | キャップ率の精密測定 |
| キャピラリー電気泳動（ポリA） | サイズでポリA長を評価 | ポリA長・分布 | ポリA長の評価 |
こんな場面で使う
- IVT・キャッピング工程のキャップ率確認
- ポリA長・分布の評価
- ロット規格・同等性評価
主な測定項目
- キャップ付加率（%）
- ポリA長（塩基数）
- キャップ構造（Cap0/Cap1）
関連分析とのつながり
キャップ・ポリAを評価するときのポイント
共転写法/酵素法でキャップ率の傾向が異なる
酵素消化条件を標準化して末端を切り出す
Cap0/Cap1の区別が自然免疫に関わる
ポリA長のばらつきを分布で評価する
RNase対策で分解アーチファクトを避ける
規格としてのキャップ率・ポリA長を設定する
