工程1：ハーベスト・初代分離
原料組織から目的細胞を遊離し、接着選択で純化する出発工程。骨髄は密度勾配、脂肪/臍帯は酵素消化。
基準法酵素消化（コラゲナーゼ）＋密度勾配遠心による単核球分離、続く接着選択
Standard Process Map細胞治療
MSC製造 基準工程マップ
この基準工程マップは、間葉系幹細胞（MSC）の製造と品質管理を、単離→拡大培養→回収→製剤・凍結保存→品質特性解析の順に整理しています。最適な手法は組織源（骨髄・脂肪・臍帯など）や効力で変わるため、各工程に代替・補完法も併記しています。
製法の条件で切り替える
◇の付いた6工程は、この条件で基準法が変わります。
全体像
工程名を押すと、その工程の説明へ移ります。工程を押すと、その場で詳しい説明が開きます。◇は条件で基準法が変わる工程です。
製法の条件で切り替える
◇の付いた6工程は、この条件で基準法が変わります。
採取・分離（2工程）
工程2：セルバンキング
◇ 分岐初期細胞を増殖・小分け凍結し、ロット間で素性の揃った出発材料を長期供給する基盤。
基準法二段階セルバンク（MCB→WCB）＋特性解析パッケージ
自家（オート）／2D平面フラスコ・スケールアウトでは
二段階セルバンク（MCB→WCB）を構築せず、患者ドナーごとの初代培養を起点とする
培養・産生（4工程）
工程3：融解・シードトレイン
◇ 分岐凍結バンクから直接大量培養は不可。融解回復と段階的シードトレインで必要な接種細胞量を確保するため必須。
基準法水浴／自動デバイスによる制御融解＋遠心でDMSO除去後、T-フラスコ静置培養で回復させ、順次大型容器へ継代するシードトレイン拡大
自家（オート）／2D平面フラスコ・スケールアウトでは
バンクバイアル融解＋シードトレインを行わず、工程[0]の患者組織分離物をそのまま回復・初期拡大に接続
工程4：プラナー拡大培養
足場依存のMSCを平面で接着増殖させ、継代数とPDLを抑えて老化前にバイオリアクター量まで確保。
基準法多層フラスコによる接着・足場依存培養（xeno-free培地）
工程5：マイクロキャリア懸濁培養
◇ 分岐平面では面積不足の臨床用量を、撹拌槽＋マイクロキャリアで制御培養し数十億規模で再現性高く取得。
基準法マイクロキャリア＋シングルユース撹拌槽バイオリアクター培養
自家（オート）／2D平面フラスコ・スケールアウトでは
マイクロキャリア＋シングルユース撹拌槽バイオリアクターを用いず、多層平面フラスコ（HYPERStack／CellSTACK等）または閉鎖系自動平面培養装置（Terumo Quan…
工程6：工程内モニタリング
細胞数・生存率・代謝物を追跡し、培地交換や回収時期の判断と増殖異常の早期検知を行う。
基準法自動細胞計数（蛍光染色）＋オフライン代謝物分析
回収・清澄化（2工程）
工程7：剥離・キャリア分離
◇ 分岐酵素で短時間剥離しメッシュ濾過でビーズと細胞のサイズ差を分離、純粋な細胞懸濁液を得る。
基準法組換え酵素による剥離＋メッシュ／インラインフィルターでのキャリア分離
自家（オート）／2D平面フラスコ・スケールアウトでは
組換え酵素による平面表面からの剥離のみ
工程8：洗浄・濃縮
◇ 分岐閉鎖系向流遠心で酵素・培地を除き、せん断を抑えつつ製剤バッファへ置換し目的濃度に濃縮。
基準法向流遠心（カウンターフロー）による自動洗浄・濃縮
自家（オート）／2D平面フラスコ・スケールアウトでは
大容量の向流遠心（kSep等）に依存せず、より小規模の洗浄・濃縮（例：Terumo LOVOによる遠心洗浄）や閉鎖系装置内の統合洗浄で処理
製剤・充填（2工程）
工程9：製剤化・フォーミュレーション
細胞を投与・凍結に適した組成へ調え、凍結保護剤と濃度を投与経路に応じて設計する。
基準法凍結保護剤含有最終製剤への処方（既製凍結保存液）
工程10：充填・速度制御凍結
投与単位に無菌充填し約1℃/分の速度制御凍結で氷晶損傷を抑え、融解後の生存・機能を担保。
基準法閉鎖系無菌充填＋速度制御凍結（CRF）→液体窒素気相保管
品質特性・分析（7工程）
工程11：表面マーカー解析
CD73/90/105陽性≥95%・造血系/HLA-DR陰性≤2%でMSC同一性を判定するISCT第2基準。
基準法多色フローサイトメトリーによる表面マーカー定量
工程12：三系統分化試験
骨・脂肪・軟骨への三系統分化を染色で確認し、幹細胞としての多分化能を裏付けるISCT第3基準。
基準法三系統分化誘導＋系統特異的染色（＋必要に応じRT-PCR）
工程13：ポテンシー試験
IFN-γ刺激でのIDO/PD-L1誘導とT細胞増殖抑制を測り、免疫調節という治療効力を担保する力価試験。
基準法IFN-γ刺激後のIDO-1／PD-L1発現測定（フロー）＋T細胞増殖抑制アッセイ
工程14：最終製品 細胞数・生存率
融解後を含む生細胞数・生存率(≥70%目安)で用量と有効性を規定する放出試験の中核。
基準法蛍光二色染色による自動生細胞計数（融解後含む）
装置セルカウンター
工程15：無菌・マイコ・エンドトキシン
最終滅菌不可・短期限の生細胞製品の安全性確保へ、無菌・マイコプラズマ・エンドトキシンを迅速法で検査。
基準法薬局方無菌試験＋核酸増幅（NAT）マイコプラズマ＋カブトガニ試薬エンドトキシン
工程16：外来性ウイルス否定試験
ヒト由来細胞製品はウイルス安全性確認が必須。無菌・マイコ・エンドトキシンとは別にICH Q5A準拠の外来性因子否定が要る。
基準法指標細胞を用いたin vitro外来性ウイルス試験＋ヒト病原ウイルス特異的qPCRパネル、必要に応じ高感度NGS／TEMによるRVLP評価
工程17：遺伝的安定性・由来同一性
◇ 分岐核型で染色体異常(造腫瘍性)を、STRで由来同一性を確認し安全性とトレーサビリティを担保。
基準法Gバンド核型分析＋STR（ショートタンデムリピート）同一性確認
自家（オート）／2D平面フラスコ・スケールアウトでは
STR解析はバンク株の同一性確認ではなく、製品が当該患者本人由来であること（チェーン・オブ・アイデンティティ／取り違え防止）の照合に用いる
公開情報にもとづく一般的な整理です。実際の構成は条件により異なります。