用語集
「比色法」とは？
別名・英語表記：発色合成基質法 ／ chromogenic method
LAL反応で活性化された酵素が発色基質を切断する吸光度変化を測定し、エンドトキシンを定量する方法。
別名・英語表記：発色合成基質法 ／ chromogenic method
LAL反応で活性化された酵素が発色基質を切断する吸光度変化を測定し、エンドトキシンを定量する方法。
比色法は、LAL反応で活性化された酵素が発色基質を切断する際の吸光度変化からエンドトキシン量を定量する方法です。同じLAL法のなかにゲル化法・比濁法・比色法という選択肢があり、それぞれ検出原理と定量性が異なるため、どの手法を選ぶかが試験の精度と運用効率に直結します。
LAL試験はゲル化法・比濁法・比色法の三つに大別されます。ゲル化法が反応のあり・なしを目視で判定するのに対し、比濁法は反応液の濁りを、比色法は発色基質の切断による色の変化をそれぞれ吸光度として読み取ります。比色法は発色という明確なシグナルを数値化するため、定量性が高く自動化しやすいという特徴があります。近年はrFCやrCRなどの非動物由来の組換え試薬法も整備が進んでおり、LAL法と並ぶ選択肢として位置づけられています。
比色法では反応速度から濃度を読み取る方式が用いられます。そのため、マイクロプレートリーダーなどの測定機器とソフトウェアを使って標準曲線を作成し、試料中のエンドトキシン濃度を定量します。機器と標準曲線を組み合わせることで定量値を算出できる点が、目視判定に依存するゲル化法との大きな違いです。薬局方の枠組みでもゲル化法・比濁法とともにバクテリアエンドトキシン試験の正式な手法として位置づけられています。
「比色法」という言葉はエンドトキシン試験に限らず、洗浄剤の特定成分の残留確認や残存タンパク質の測定など、製造現場の幅広い分析場面で使われます。同じ名称でも目的や測定対象が異なるため、文脈を確認することが重要です。エンドトキシン管理の文脈で「比色法」と出てきた場合は、LAL反応を利用した発色合成基質法を指しているとみてください。
この定義はProglenth編集部が一般的・基礎的な内容として整理したものです。実際の管理基準・要件は製品・企業・各極の規制により異なります。 正確な運用は各極の薬局方・ガイドライン（ICH／GMP等）やメーカーの一次情報をご確認ください。