シリーズ全7本・合計 約42分
プラスミドDNAと鋳型のDNA
遺伝子治療やmRNAの出発原料になるDNAを、大腸菌で作る方法と大腸菌を使わない方法の違いから選べます。
入門1本基本4本実務2本1本目から読む- 入門この分野がはじめての人は、ここから読んでください。
プラスミドDNAの製造工程とは？発酵から精製、調達の確認点まで2021年8月、Danaher はプラスミドDNA、mRNA、タンパク質を受託製造する Aldevron の買収を、約96億ドルで完了しました。1本目・約7分- 基本仕組みと決まりを、ひとつずつ説明します。
プラスミドDNAの発酵から精製まで：ねじれを守る装置と資材の選び方プラスミドDNAの製造では、環状DNAが負にねじれた閉環状の二本鎖、スーパーコイル体（supercoiled、ccc）の割合が品質の中心です。2本目・約5分
プラスミドDNAの原料品質とは？用途から逆算する見方プラスミドDNAの成績書に載るスーパーコイル含量は、供給者の公開資料でも、目安が「80%超」のところと「90%超」のところに分かれています。3本目・約5分
線状DNAとは：プラスミド由来・PCR産物・閉端の見分け方ほぼ同じ長さの線状DNAを、普通のゲルに流すと、開いた末端のものも閉じた末端のものも、ほぼ同じ位置に出ます。4本目・約6分
閉端直鎖状DNAとは？dbDNA・ceDNA・msDNAの違いと選び方マウスではヒト第VIII因子が正常値の205%まで作られたDNAの製剤が、サルでは最大でも2%でした。5本目・約6分- 実務現場で迷う判断と、確かめる手順を説明します。
doggybone DNA（dbDNA）とは？大腸菌なしで作る閉端DNAmRNAワクチンや遺伝子治療の材料になるDNAは、長らく大腸菌の中でプラスミドとして増やして作られてきました。6本目・約7分
dbDNA/ceDNAをIVT鋳型に使うと何が変わり、何が残るか両端が閉じているから壊れにくい。それがdbDNAの売りですが、mRNAのIVTに使うときは、その閉じた端の片方を、転写の前にわざわざ切ります。7本目・約6分
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シリーズ全12本・約71分mRNAをどう作るか
鋳型のDNAからmRNAを合成し、キャップを付け、副生物を落とすまでの工程と、そこで品質が決まる場所が分かります。
入門1本基本4本実務7本シリーズ全8本・約52分mRNAと核酸の品質分析核酸医薬の純度・全長性・キャップ・ポリAを、どの方法で測り、数字のどこを疑うかが分かります。
入門1本基本3本実務4本シリーズ全10本・約62分LNP（脂質ナノ粒子）をどう作り、測るか核酸を包む脂質の粒を、脂質の設計・混ぜ方・粒子径と封入率の測り方・保存の順に理解できます。
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