AAVの力価は3種類ある：ゲノム力価・感染力価・効力の違いと読み方

Proglenth 編集部公開 2026-07-22更新 2026-10-09約6分で読めます

「ゲノム力価は出ているのに、細胞に入れると思ったほど効かない」。AAVの開発では、一度は聞く話です。原因はたいてい製品ではなく、力価という一語が、別のものを三つ束ねていることにあります。

同じ細胞株RC32で感染力価を測ると、AAV2のvg/IU（ゲノム力価と感染力価の比）はほぼ1対1に出ます。同じ系でAAV8を測ると、350から460に開きます。この系はAAV2で組み立てられたもので、培養細胞の中ではAAV2のほうがAAV8よりずっと感染しやすい、というのが論文の読み方です。AAV8が400倍劣っているという話ではありません。数字の分母には、血清型と試験系の相性が入っています。

開発の人は試験系を選ぶ前の考え方を、品質保証の人は規格に何を書くかを、購買や営業の人は受託先に何を聞くかを、ここで押さえられます。ゲノム力価そのものの測り方はddPCRによるゲノム力価測定に置いてあります。

三つの力価 ― 数えているものが違う

ゲノム力価は粒子の中のゲノムを数え、感染力価は細胞に入れた粒子を数え、効力の試験は入ったあとに作られたものを測ります。

	ゲノム力価	感染力価	効力（発現）の試験
数えるもの	ゲノムを抱えた粒子	細胞に入り、ゲノムを増やせた粒子	入ったあとに作られたタンパク質の量や活性
代表的な方法	デジタルPCR	RC32などの細胞を使うTCID50	産物の免疫測定、酵素活性、レポーター
測定の揺れ	小さい	中くらい	大きい
規格での役割	投与量の基準	工程の一貫性を追う	作用機序に近い効きの確認

ゲノム力価は、DNaseでカプシドの外に漏れた核酸を分解し、カプシドを壊してから中のゲノムを数えます。投与量を決める数字はここから出ますが、数えているのはゲノムを抱えた粒子の数だけで、細胞の中で何をするかは問うていません。ゲノムのない空のカプシドも含めた総数との比から、充填の程度を見積もる使い方は空カプシドと実カプシドで扱っています。

感染力価と効力の試験は、細胞を使います。上の層ほど「効く」に近づく代わりに、測定の揺れも同じだけ大きくなります。

三つは互いの代わりになりません。何を数えた力価なのかを言わずに、数字だけを並べても判断はできません。

vg/IUの読み方 ― 同じ系でAAV2は1対1、AAV8は350〜460

感染力価の標準的な系のひとつが、AAV2のrepとcapの遺伝子を持つHeLa由来の細胞株RC32です。検体を10倍ずつ薄めて細胞に加え、アデノウイルスを重ねて感染させ、増えたベクターゲノムをPCRで検出します。陽性のウェルの分布から、感染した単位の数（IU）を求め、ゲノム力価をIUで割ったものがvg/IUです。

報告されている値は、同じRC32の系でAAV2がほぼ1対1、AAV8が350から460です（Françoisらの2018年の報告）。論文はこの開きを、TCID50法がAAV2で組み立てられたことの表れだと説明しています。別の形質導入の系でrAAV8を測った報告では、粒子と感染の比が数千の桁に達しました。血清型を変えるだけで、比が二桁から三桁動きます。

RC32は、AAV2の複製を検出するために作られた細胞株です。AAV8をここで測ると、受容体への結合も、細胞内の輸送も最適ではありません。系が拾っているのは、感染そのものより、AAV2向けの系にどれだけ合うかです。Françoisらは、核への移行に必要なVP1を欠いたAAV8を作り、「粒子としては同じだが感染だけができない」陰性対照に使って、系の選択性を確かめました。

vg/IUが大きいことは、その血清型がヒトで効かないことを意味しません。比が映しているのは、製品の質と、血清型と試験系の相性の両方です。

POINT

受託先に聞くのは「感染力価はいくつ出ますか」ではなく、「どの細胞株で、どのヘルパーウイルスを使い、何時間置いて測りますか」です。系が違うvg/IUは、並べても優劣になりません。比べられるのは、同じ系、同じ細胞バンク、同じ標準品で測った自社のロット同士です。

10倍刻みの粗さ ― 感染力価を規格の中心に置かない

感染力価の測定には、原理から来る粗さがあります。

TCID50は、10倍ずつ薄めた系列のどこで陽性が半分になるかを見る方法です。隣り合う段のあいだを埋める情報がないので、ロット間で2倍違っても、同じ段に収まれば同じ値で出ます。逆に段の境目をまたげば、実際の差が小さくても10倍の差として記録されることがあります。

そこに細胞側の揺れが乗ります。継代数、播いた密度、その日の細胞の状態、アデノウイルスのロットの違い。機器で測るゲノム力価とは、揺れの桁が違います。

だから感染力価の値そのものを、規格の中心に置くのは筋がよくありません。使いどころは、工程の一貫性を追う指標です。同じ系で測り続けたときに比が動いたら、工程か検体に何かが起きたと読みます。

効力の試験 ― 作用機序に近づくほど増す揺れ

感染力価は、ゲノムが細胞に届いたところまでしか見ません。届いたゲノムが読まれ、産物が作られ、働くかどうかを見るのが、効力の試験です。

血友病B向けのAAV8ベクター（第IX因子の遺伝子）で報告された例が分かりやすい。出荷試験として、第IX因子を持たないマウスに投与して血漿中の産物を測る動物試験が使われてきました。これに代わる方法として、肝細胞株のHepG2にベクターを感染させ、培地に出た第IX因子の活性を発色基質で測る細胞ベースの試験が報告されています。25ロットで動物試験の結果と有意に相関し、ばらつきは細胞を使う試験が小さく、出荷試験で動物の代わりになりうると結論しています。

この層は絶対値では表しません。標準品と検体を同じ平板に並べ、用量反応の曲線が平行かを確かめたうえで、力価の比を出します（バイオアッセイと相対力価）。

どこまで作用の連鎖を下りて測るかは、難しい選択です。2022年に承認されたHemgenix（AAV5の血友病B遺伝子治療）では、CSL BehringがEMAとFDAと協議しながら効力試験を開発した経緯を寄稿で振り返っています。

作用機序に近づくほど、数字は「効く」に近づき、同じだけ揺れます。この交換条件は避けられません。

試験から保証へ ― FDAの草案が求めるもの

規制側の考え方も、近年動いています。

FDAは2011年に、細胞・遺伝子治療製品の効力試験の指針を出しました。単一のアッセイで足りなければ、複数を束ねる考え方です。2023年12月に出た草案「Potency Assurance for Cellular and Gene Therapy Products」は、これを置き換える位置づけです。

力点は、効力を出荷試験だけで担保する発想から離れたことにあります。草案は、工程の設計、工程と原材料の管理、工程内の試験、出荷試験の組み合わせで、効力を担保する戦略を求めています。揺れる測定に頼りきらない工程をつくる、という組み立てです。規格の考え方はICH Q6B、分析法の妥当性確認はICH Q2(R2)に沿います。遺伝子治療の品質管理の全体は遺伝子治療の品質管理にあります。

測定の分解能で届かない部分を、原材料と工程の管理で埋める。それが草案の要旨です。