Makers & Products
逆転写酵素・RT試薬（配列確認用） のメーカー・製品一覧
逆転写酵素・RT試薬
逆転写酵素・RT試薬は、RNAを鋳型にcDNAを合成する酵素試薬で、配列確認のためのシーケンス前調製に用います。改変MMLV系は反応温度や処理性、阻害剤耐性を高め、GCリッチや長鎖鋳型でも全長cDNAを得やすくします。鋳型の難易度に応じた処理性・反応温度・耐阻害性が酵素選定の見極めどころです。
選び方
まず鋳型（RNA）の長さと量、二次構造の強さで絞る。長鎖やGCリッチ・配列確認なら高熱安定型を、ごく微量や低コピーなら高感度設計の専用キットを選ぶ。日常のRT-qPCRはマスターミックス型が手数とばらつきを抑えやすい。
- 対応鋳型長
- 反応温度の上限
- 鋳型の入力量
- キット型か単体酵素か
- 用途(配列確認/qPCR)
代表的な製品迷ったらここから
Thermo Fisher ScientificSuperScript IV Reverse Transcriptase耐阻害性が高く短時間で全長cDNA。ウイルスゲノム配列確認や5'RACEの定番高い処理性と耐阻害性で短時間に全長cDNAを合成。アンプリコン型ウイルスゲノムシーケンスや5'RACEなど配列確認用途に広く使われるM-MLV系酵素。公式情報 →
Bio-RadiScript Reverse Transcription Supermix for RT-qPCR酵素もプライマーも1本化。26分でピペット誤差を抑える日常RT-qPCR向け酵素・プライマー・dNTP・バッファーを1本化したマスターミックス。26分の短時間プロトコルでピペッティング誤差を抑え、RT-qPCRに最適。公式情報 →
AgilentAffinityScript Multiple Temperature Reverse Transcriptase37〜60℃の広い温度域で最大20kb。二次構造由来の阻害を抑えたい時に高熱安定化したqPCRグレードMMLV。37〜60℃の広い温度域で高収率にcDNA（最大20kb）を合成し、二次構造由来の阻害や非特異プライミングを抑制。公式情報 →
QIAGENSensiscript RT Kit50ng未満の極微量RNA向け。単一細胞や微小検体の高感度RT-PCRに50ng未満の極微量RNA向けに設計された逆転写酵素キット。単一細胞や微小検体からの高特異・高感度なRT-PCRに用いられる。公式情報 →
高処理性・高熱安定 M-MLV系（長鎖・配列確認向き）（5）
長鎖・GCリッチ鋳型から全長cDNAを取り、配列確認や5'RACEに進めたい時
Thermo Fisher ScientificSuperScript IV Reverse Transcriptase高い処理性と耐阻害性で短時間に全長cDNAを合成。アンプリコン型ウイルスゲノムシーケンスや5'RACEなど配列確認用途に広く使われるM-MLV系酵素。公式情報
Thermo Fisher ScientificSuperScript III Reverse TranscriptaseRNase H活性を低減した改変MMLV。最大55℃で反応でき、GCリッチ鋳型でも全長cDNA（>12kb）を高収率に合成し、シーケンス前のcDNA調製に適する。公式情報
Thermo Fisher ScientificMaxima H Minus Reverse Transcriptasein vitro進化で得た高処理性MMLV。野生型比50倍の処理性で最大20kb・最大65℃の反応に対応し、阻害剤耐性も高い配列確認向け酵素。公式情報
New England BiolabsProtoScript II Reverse TranscriptaseRNase H活性を低減した組換えM-MuLV。最大50℃で動作し、高い特異性で最大12kbの全長cDNAを合成。低発現RNAのRT-PCRに適する。公式情報
RocheTranscriptor Reverse Transcriptase / First Strand cDNA Synthesis Kit最大65℃・最大14kbに対応する高熱安定酵素。GCリッチ・二次構造の強い鋳型でも添加剤なしで全長cDNAを合成でき、二段階RT-PCRに適する。公式情報
高温・多温度対応／高忠実 cDNA合成（2）
二次構造が強い鋳型を高温で開きつつ、塩基の取り違えを抑えて高精度に増幅したい時
標準 RT試薬キット（cDNA合成・RT-PCR）（6）
日常のRT-qPCR・発現解析を、手数とばらつき少なく回したい時
Takara BioPrimeScript RT Reagent Kit (Perfect Real Time)RNase H欠損の改変MMLV「PrimeScript」を核とする二段階RT-qPCR用キット。RTase・RNase阻害剤・各種プライマー・dNTP・バッファーを同梱し42℃で合成。公式情報
東洋紡ReverTra Ace qPCR RT Kit / Master Mix点変異で改良したRNase H欠損型M-MLV「ReverTra Ace」を用いた高効率cDNA合成キット。15分で反応が完了し低発現mRNAの検出にも対応。公式情報
PromegaGoScript Reverse Transcriptase / Reverse Transcription System組換えM-MLVとqPCR最適化バッファーの組合せ。阻害剤存在下でも希少〜豊富な転写産物を安定に逆転写し、二段階RT-qPCRに検証済み。公式情報
Bio-RadiScript cDNA Synthesis KitRNase H+ MMLVにオリゴdT・ランダムプライマーを混合した第一鎖cDNA合成キット。1µg〜1pgの広い入力範囲で再現性の高いcDNAを調製。公式情報
Bio-RadiScript Reverse Transcription Supermix for RT-qPCR酵素・プライマー・dNTP・バッファーを1本化したマスターミックス。26分の短時間プロトコルでピペッティング誤差を抑え、RT-qPCRに最適。公式情報
QIAGENQuantiTect Reverse Transcription KitゲノムDNA除去ステップを含む二段階RT-qPCR用キット。短時間で再現性の高いcDNAを合成し、配列確認・発現解析の前段に使われる。公式情報
微量・低コピー鋳型向け／単体酵素（4）
単一細胞や微小検体など、ごく微量・低コピーのRNAを高感度に検出したい時