用語集
「パッケージング」とは？
必要な部品遺伝子を細胞に導入し、ウイルスベクター粒子を組み立てさせる製造工程。
必要な部品遺伝子を細胞に導入し、ウイルスベクター粒子を組み立てさせる製造工程。
パッケージングとは、必要な部品遺伝子を細胞に導入してウイルスベクター粒子を組み立てさせる製造工程です。カプシドの形成とゲノムの封入は別々の効率で進むため、目的のゲノムを内包しない空カプシドや、意図しない配列を封入したミスパッケージング粒子が混在しやすく、製品品質に直結する重要な管理ポイントになります。
AAVの生産系では、カプシドの組み立てとゲノムのパッケージングは別々の効率で進みます。殻はどんどん組み上がる一方で、ゲノムのパッケージングはそれより遅く、律速になりやすいのです。その結果、Capに対してゲノム供給やパッケージング能が不足すれば、ゲノムを内包しない空カプシドの比率が上がりやすくなります。空カプシドの生成は避けられないものですが、この比率をどう抑えるかが製造設計の重要な課題となります。なお、ITRがAAVゲノムの複製とパッケージングのシグナルとして働き、最終的にカプシド内に詰め込まれるのはこのITR間の配列です。
AAVのパッケージング機構は目的のベクターゲノムだけを選択的に封入するわけではなく、宿主細胞DNA断片やプラスミドのバックボーンやヘルパー配列の一部を封入したカプシドが一定割合で生じます。これをミスパッケージングと呼びます。また、パッケージング過程では全長に満たない部分的ゲノムや切断された断片が封入されることもあり、標的領域が末端側か中央側かで含まれるコピー数が変わりえます。この画分を減らすには、プラスミド設計（バックボーンの縮小など）や産生条件を上流で最適化し、封入されるDNAの絶対量を入口で抑える発想が重要になります。
産生方式は三重トランスフェクションのほか、Rep/Capや目的遺伝子を組み込んだプロデューサー／パッケージング細胞を使う構成もあります。いずれの方式でも、製造の過程でベクターとパッケージング／ヘルパー構成要素や産生細胞が持つ内在性ウイルス様配列との間で組換えが起こると、まれに増殖能を取り戻したウイルスが生じることがあります。導入遺伝子ベクターとパッケージング／ヘルパー構成要素間の相同組換え、内在性レトロウイルス様配列との組換え、複数構成要素が同一細胞内で共存することによる意図しない再構成、これらが重なると失われていたはずの増殖に必要な機能がまれに再構成されてしまいます。
この定義はProglenth編集部が一般的・基礎的な内容として整理したものです。実際の管理基準・要件は製品・企業・各極の規制により異なります。 正確な運用は各極の薬局方・ガイドライン（ICH／GMP等）やメーカーの一次情報をご確認ください。