用語集
「二本鎖RNA」とは？
別名・英語表記：二本鎖RNA（dsRNA） ／ double-stranded RNA
IVTの副生成物などで生じるRNAで、自然免疫を強く刺激するため低減と定量が求められる。
別名・英語表記：二本鎖RNA（dsRNA） ／ double-stranded RNA
IVTの副生成物などで生じるRNAで、自然免疫を強く刺激するため低減と定量が求められる。
dsRNAは、IVTでmRNAを合成する際に鋳型非依存の伸長や自己プライミングといったメカニズムから必ず副生する二本鎖のRNAです。自然免疫を刺激する強い免疫原性を持つ一方、一本鎖RNAと物性が近いために従来の精製では取り除きにくく、mRNA医薬品の製造において特に管理が重要な不純物として位置づけられています。
IVTでmRNAを合成すると、目的の一本鎖RNAと並行して、3'自己プライミング（loopback）やアンチセンス転写など、鋳型に依存しない経路からわずかなdsRNAが必ず生じます。さらに、IVT後にDNA鋳型を除去せず残存させると、余分な転写鋳型として働き、dsRNAの副生量を増やす一因になります。鋳型DNAの純度そのものも下流でのdsRNA生成量に直結するため、鋳型精製は品質設計の起点として位置づけることが求められています。
dsRNAは一本鎖RNAと物性が近いため、従来の精製手法では両者を分けにくいという根本的な難しさがあります。そのため、反応条件の調整に加えて、下流のクロマトグラフィー精製による除去が必要とされており、IP-RP-HPLCによる鎖長分離だけで代替できるものではありません。除去と検出にはdsRNA専用のクロマト手法や抗体法が主役となります。
dsRNAはウイルスの目印として自然免疫系に認識されるため、強い免疫原性を持ちます。製剤中に残存した場合、自然免疫を刺激してmRNAの翻訳効率を下げることにつながります。IVTに固有の副生成物であり、CleanCapのようなキャッピング技術を用いてもdsRNAの生成自体は避けられないことから、別途専用の対処が必要です。
この定義はProglenth編集部が一般的・基礎的な内容として整理したものです。実際の管理基準・要件は製品・企業・各極の規制により異なります。 正確な運用は各極の薬局方・ガイドライン（ICH／GMP等）やメーカーの一次情報をご確認ください。