EU GMP Annex 1とは？改訂で問われる無菌製造の「足りる根拠」

EU GMP Annex 1無菌医薬品の製造に関するEU GMPの付属書。汚染管理戦略などを求める無菌製造の基準。詳しく →とは、注射剤のような無菌医薬品を作る工場に、何を求めるかを定めたEUのGMP医薬品を一定の品質で安全に造るために守るべき製造・品質管理の基準（適正製造規範）です。詳しく →の附属書です。2022年に全面改訂され、無菌製造の手順書作業の手順を定めた文書。品質システムの要素を具体化し、査察でも運用が確認される。詳しく →を書き、査察に答える品質保証や製造の担当者の仕事に直接かかわります。

ただし、改訂の中心は、装置や試験の数を増やすことではありません。大きく変わったのは、いまの管理で汚染を防げていると言える理由を、工場が自分で示すことを求めた点です。

フィルターの試験、培地充填、グレードA充填点周辺など無菌操作の中心となる最高清浄度区域。作業中も連続監視される。詳しく →の菌といった具体的な項目で、旧版の書き方のままだと何が合わなくなるのかが、この記事で分かります。

1. Annex 1は、無菌製造のどこまでを決めた文書なのか？

Annex 1は、無菌医薬品を作るときの部屋の清浄度、人と設備、滅菌、無菌操作外部から微生物を入れずに工程を進める操作。最終滅菌できない細胞治療では全工程で無菌性を維持する。詳しく →の確かめ方までを定めたEUのGMPの附属書です。 GMP（医薬品の製造と品質管理原料・資材・中間体・製品を規格に照らして試験し、使ってよいか、出荷してよいかの合否を決める仕事です。GMPでは製造部門から独立させます。詳しく →の基準）の本体が全製品に共通の決まりを書き、附属書は無菌製剤のような特定の製品に足す決まりを書きます。

いまの版は2022年8月25日に公表され、2023年8月25日から適用されています。凍結乾燥機試料を凍らせてから減圧し、氷を昇華させて水分を除く乾燥装置です。熱に弱い医薬品を安定な状態で保存できます。詳しく →の扱い（8.123項）だけは、2024年8月25日からの適用でした。改訂はEUの査察官の作業部会と、各国の査察当局でつくるPIC/S（医薬品査察協定・査察協同スキーム）の委員会が共同で進め、PIC/SのGMPガイドにも同じ内容が入っています。

EU向けに出荷する工場だけの話ではありません。PIC/Sの加盟当局の査察でも同じ内容のガイドが基準になるため、EUに輸出しない無菌製剤の工場でも、手順書の読み方が問われます。

Annex 1には、何が書かれているのか

いまの版は11章でできています。適用範囲（1章）と原則（2章）のあと、品質システム、建物、設備、ユーティリティ水・空調・ガスなど、製造を直接支える設備の総称。適格性評価や汚染管理の対象になる。詳しく →（水・ガス・真空など）、人員、製造と個別の技術（無菌操作・最終滅菌・凍結乾燥凍らせた試料を減圧下に置き、氷を直接水蒸気にして（昇華）水分を除く乾燥の方法です。液のままでは安定性を保ちにくいタンパク質製剤などに使い、使う前に溶かして戻します。詳しく →など）、環境と工程のモニタリング（培地充填製品液の代わりに培地を充填ラインに流し、実工程を模擬して無菌操作に汚染が入らないことを実証する試験。詳しく →を含む）、品質管理と続き、最後が用語集です。

対象は、原薬原薬。精製を終えた有効成分そのもので、製剤化する前の段階を指す。詳しく →・添加剤・一次包装材料・最終製剤まで、無菌で作るすべての製品です。⁠文中に書かれた限度・頻度・範囲は、最低限の要求として扱うべきとされています⁠（1章）。

ただし、無菌でない製品に無関係とは限りません。汚染管理戦略人・設備・原材料・環境など汚染の全経路を一枚に束ね、抑え込みの有効性を継続評価する設計図。詳しく →・清浄度の区分・更衣などの考え方は、一部の液剤や軟膏、バイオバーデン（製品中の微生物の量）を低く抑える生物由来の中間体の製造にも使えるとされています。その場合は、どの原則を当てはめたかを文書にします（1章）。

2. 重要：改訂で変わったのは、手順の数なのか「足りる理由」なのか？

改訂版は、工場全体で汚染をどこで止めているかを、汚染管理戦略（CCS）人・設備・環境・工程の汚染経路を一望し、管理策全体でリスクを許容水準まで下げていることを示す枠組み。という1つの文書で示すことを求めました（2.3項）。 旧版にも、更衣・清掃・モニタリングの手順はありました。ただ、それぞれが別々に書かれていて、組み合わせると汚染を防げると言える理由は、どこにもまとまっていませんでした。

CCS人・設備・環境・工程の汚染経路を一望し、管理策全体でリスクを許容水準まで下げていることを示す枠組み。は、人、部屋と設備、水や空気、原料と容器、工程、モニタリングを、汚染がどこから入り、どこで止まり、それがどのデータで分かるかという1本の筋でつなぎます。既にある手順書を捨てる必要はなく、2.3項は、適切に管理されている仕組みは置き換えなくてもよいが、CCSの中で参照し、互いの関係を理解しておくべきだ（should）としています。

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同じ考え方は、設備の選び方にも及びます。4.3項は、作業者が充填部に直接手を入れる回数を減らす囲い（密閉したアイソレーター外気と隔てた無菌の作業空間をつくり、その中で無菌操作を行う装置です。RABSも作業域を囲うバリアの一種です。詳しく →や、制限区域アクセスバリアシステム（RABS））の使用をCCSで検討すべきだとし、使わない方法を選ぶなら、その理由を示すべきだとしています。「手順どおりにやっている」だけでは答えにならず、「その手順で足りるのはなぜか」に答えられるかが問われます。

囲いの仕組みは無菌操作、CCSの書き方は汚染管理戦略（CCS）で説明しています。この考え方がとくに目に見える形で表れたのは、次の3つの項目です。

3. 除菌フィルターは、PUPSITとして使う前にも試験が要るのか？

原則として、滅菌したあと、使う前にも完全性試験を行うべき（should）とされています（8.87項）。 この試験を、使用前・滅菌後の完全性試験（PUPSIT除菌フィルターを使用する前、滅菌後にろ過膜の完全性を確認する試験。無菌性を担保する管理。詳しく →）と呼びます。

使用後の試験は以前から行われてきました。それでも、なぜ使う前の試験まで求められるのか。フィルターを滅菌したり配管に組んだりする間に膜が傷むことがあり、使用後の試験だけでは、その傷みをろ過の前に見つけられないからです。8.87項も、目的を「準備のあいだに生じた損傷を調べること」と書いています。

一方で、同じ項は、ごく少量の液をろ過する場合のように、工程の制約で滅菌後の試験ができないこともあると認めています。そのときは別のやり方をとってよい（may）が、十分なリスク評価を行い、ろ過が完全でないリスクを下げる管理を置くことが条件です。リスク評価で考える点として、次のようなものが挙がっています。

• フィルターの滅菌⁠：滅菌の工程を深く理解し、膜を傷めにくい条件で管理しているか。
• 供給の経路⁠：滅菌を外部に委託しているなら、その施設、輸送、包装で膜を傷めないか。
• 製品の性質⁠：液に含まれる粒子が、使用後の試験の値を変えて、膜の欠陥を見えなくしないか。

PUPSITは、行うかどうかの二択の項目ではありません。行わないなら、上の点をどう押さえたかをCCSの中で説明できることが、行うのと同じくらい重く見られます。試験の方法そのものはフィルター完全性試験にまとめています。

4. 培地充填やグレードAで菌が1つ出たら、様子見は許されるのか？

培地細胞を体外で生存・増殖させるために必要な栄養・エネルギー源・成長因子などを含む液体または固体の環境基盤。詳しく →充填で汚染された容器が1本でも出れば、その培地充填は不合格です（9.46項）。 培地充填は、無菌操作のプロセスシミュレーション無菌操作の妥当性を、製品の代わりに培地を流して微生物混入がないか確認するシミュレーション。詳しく →（APS）とも呼ばれ、薬液の代わりに菌が育つ培地を実際のラインで充填し、容器を培養して菌が育たないかを見る試験です。

旧版（2008年）は、充填した本数で扱いを分けていました。5,000本未満なら汚染は0本であるべきで、5,000本以上では、1本なら調査（5,000〜10,000本では再実施の検討を含む）、2本なら調査のうえ再バリデーションとしていました。

現行版は、目標を「増殖なし」とし、1本でも出たら次のことを行うべきだとしています。

• 原因の調査⁠：もっとも可能性の高い原因を特定します。
• 是正⁠：原因に合った対策を決めて実施します。
• 繰り返しの成功⁠：工程が管理された状態に戻ったと示すため、連続して成功する培地充填を、通常は少なくとも3回行います。
• 出荷済みのロットの見直し⁠：前回成功した培地充填から後に作ったロットの記録を速やかに見直し、無菌性が損なわれた可能性を評価します。

グレードA（充填の真上のような、製品がむき出しになる区域）の環境モニタリング無菌製造区域の空気・表面・作業者を微粒子や微生物で継続監視し、汚染管理の状態を記録する活動。詳しく →も同じ考え方です。表6は、グレードAの微生物の処置基準を数値ではなく「増殖なし」と書き、注記で、グレードAでは菌が育てばどれも調査すべきだとしています。

どちらの場合も、「1本なら様子見」「1個なら基準内」とは読めません。1つ出たことが、原因を調べる出発点です。頻度や培養の条件は環境モニタリングと培地充填（APS）で説明しています。

参考文献

• European Commission, EudraLex Volume 4, EU GMP Annex 1: Manufacture of Sterile Medicinal Products（2022年8月公表、2023年8月25日適用。11章の構成と、1章 適用範囲（限度・頻度・範囲は最低限の要求、無菌でない製品への準用）、CCSは2.3項、RABS・アイソレーターは4.3項、PUPSITは8.87項、グレードAの微生物は表6、培地充填の判定は9.46項）
• European Commission, EU GMP Annex 1: Manufacture of Sterile Medicinal Products（2008年版）（旧版の培地充填の判定は69項）
• PIC/S, Entry into force of revised Annex 1（PE 009-17）