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還元剤・アルキル化剤(DTT/TCEP/IAA・分析グレード) のメーカー・製品一覧
還元・アルキル化前処理
ジスルフィド結合を切断する還元剤(DTT/TCEP)とチオールを保護するアルキル化剤(IAA)の分析グレード試薬です。CE-SDSやLC-MSの試料前処理工程で、抗体を還元・修飾して解析に供する目的に使われます。TCEPの安定性や無臭性などDTT代替の利点を、前処理ワークフローに合わせて選定してください。
選び方
ジスルフィド(S-S結合)を切る還元剤と、切った後のチオール(SH基)を塞ぐアルキル化剤の組み合わせで選びます。臭いや安定性で扱いやすいTCEPか、定番で安価なDTTか、まず還元剤を決め、用途(電気泳動・質量分析・CE-SDS純度評価)に合うアルキル化剤や前処理キットを合わせます。微量分析や定量再現性が要るなら、高純度・秤量不要のシングルユース型が安心です。
- 還元剤の種類(TCEP/DTT)
- 純度・分析グレード
- 形態(粉末/溶液/小分け)
- アルキル化剤との相性
- 用途(MS/電気泳動)
代表的な製品迷ったらここから
Thermo Fisher ScientificBond-Breaker TCEP Solution, Neutral pH(0.5M)無臭・中性pHの調製済み0.5M。試料バッファーの10XストックとしてDTT・βMEの代替に。中性pHの安定な0.5M TCEP溶液。無臭でジスルフィドを室温・数分で還元し、SDS-PAGE/CE-SDS試料バッファーの10Xストックとして使えるためDTT・βMEの代替に。公式情報 →
Sigma-AldrichTCEP hydrochloride(C4706, ≥98%)質量分析前処理の定番グレード。DTTより安定でジスルフィドを選択的に還元。ペプチド・タンパク質のジスルフィドを選択的に還元する水溶性還元剤。DTTより安定で、質量分析前処理に広く使われる定番グレード。公式情報 →
Thermo Fisher ScientificPierce Iodoacetamide, Single-Use / No-Weigh(A39271)秤量不要の小分け型。毎回新鮮な試薬でカルバミドメチル化(+57Da)を安定に。30×9.3mgの秤量不要シングルユース型ヨードアセトアミド(99% NMR)。新鮮な試薬を毎回使え、システインのカルバミドメチル化(+57Da)を安定に行える。公式情報 →
G-BiosciencesFOCUS Protein Reduction-Alkylation Kit(786-231)TCEP還元+ヨードアセトアミドを2ステップで。再酸化を抑え電気泳動/MS前処理を標準化。TCEPによる還元とヨードアセトアミドによるアルキル化を簡便な2ステップで行うキット。チオール再酸化を抑えつつ電気泳動/MS前処理を標準化。公式情報 →
TCEP(非チオール還元剤)(5)
無臭で安定、酸性・変性下でも効く。チオール反応性試薬と併用したい・DTTの臭いを避けたい時に。
Thermo Fisher ScientificBond-Breaker TCEP Solution, Neutral pH(0.5M)中性pHの安定な0.5M TCEP溶液。無臭でジスルフィドを室温・数分で還元し、SDS-PAGE/CE-SDS試料バッファーの10Xストックとして使えるためDTT・βMEの代替に。公式情報
Sigma-AldrichTCEP hydrochloride(C4706, ≥98%)ペプチド・タンパク質のジスルフィドを選択的に還元する水溶性還元剤。DTTより安定で、質量分析前処理に広く使われる定番グレード。公式情報
東京化成工業(TCI)Tris(2-carboxyethyl)phosphine Hydrochloride(T1656, >98.0%)白色結晶のTCEP-HCl。ジスルフィドを迅速・不可逆に還元し、無臭で取り扱いやすい分析・研究用グレード。公式情報
Gold BiotechnologyTCEP-HCl(CAS 51805-45-9, ≥98%)高純度・無臭のチオールフリー還元剤。酸性・変性条件下でも活性を保ち、プロテオミクス/チオール特異的標識の前処理に適する。公式情報
DTT(ジチオトレイトール)(5)
安価で定番の還元剤。SDS-PAGEや一般的なSH基還元に。溶液型なら秤量不要で手早い。
Sigma-AldrichDL-Dithiothreitol, for molecular biology(D9779)分子生物学用DTT粉末(≥98% HPLC)。チオールタンパク質の還元やジスルフィド開裂に用いる汎用グレード。公式情報
Sigma-AldrichDL-Dithiothreitol BioUltra(43815, ≥99.5%)DNase/RNase/プロテアーゼフリーの高純度BioUltra DTT。微量分析や酵素を含むワークフローでの夾雑物リスクを抑える。公式情報
FUJIFILM Wako1mol/L (±)-ジチオトレイトール(DTT)溶液調製済み1M DTT水溶液。秤量不要で還元バッファーに添加でき、SDS-PAGE等のSH基還元に使える国内入手しやすいグレード。公式情報
ヨードアセトアミド(アルキル化剤)(4)
還元後のシステインを塞いでジスルフィド再形成を防ぐ。ペプチドマッピング・LC-MS前処理に。
Sigma-AldrichIodoacetamide BioUltra(I1149, ≥99% NMR)高純度のチオールアルキル化剤。還元後のシステインをカルバミドメチル化してジスルフィド再形成を防ぎ、ペプチドマッピング/LC-MS前処理に用いる。公式情報
Sigma-AldrichIodoacetamide, Single-use vial(A3221)シングルユース小分けバイアルのヨードアセトアミド。開封ごとの失活・コンタミを避け、プロテオミクスの定量再現性を高める。公式情報
Thermo Fisher ScientificPierce Iodoacetamide, Single-Use / No-Weigh(A39271)30×9.3mgの秤量不要シングルユース型ヨードアセトアミド(99% NMR)。新鮮な試薬を毎回使え、システインのカルバミドメチル化(+57Da)を安定に行える。公式情報
Sigma-AldrichN-Ethylmaleimide(NEM, 04260, ≥99% HPLC)システイン残基を共有結合で修飾するマレイミド系アルキル化剤。TCEP還元後の遊離チオールキャップに用い、酸化アーティファクトを抑える。公式情報
CE-SDS/前処理キット(4)
還元/非還元の純度評価を標準化したい時に。試薬一式が揃い手順がぶれにくい。
SCIEXCE-SDS Biologics Purity Analysis Kit(C30085 ほか)CE-SDS純度分析用キット。SDS-MWサンプルバッファーに加え、非還元測定用のヨードアセトアミド(IAM)や還元用βME運用を含み、抗体の還元/非還元純度評価に対応。公式情報
SCIEXSDS-MW Analysis Kit(PA 800 plus用)PA 800 plus向けCE-SDS(約10〜225kDa)の純度・分子量分析キット。還元・非還元タンパク質の前処理試薬と分離マトリクスを提供。公式情報
G-BiosciencesFOCUS Protein Reduction-Alkylation Kit(786-231)TCEPによる還元とヨードアセトアミドによるアルキル化を簡便な2ステップで行うキット。チオール再酸化を抑えつつ電気泳動/MS前処理を標準化。公式情報
G-BiosciencesFOCUS Protein Reductant(TCEP, 786-230)水溶性で安定なTCEP還元剤。室温・数分でジスルフィドを完全還元し、アルキル化前段の還元工程に使える。公式情報