工程1：セルバンク管理
株ごとに毒素・代謝産物の産生能が異なり、出発株の同一性保証が安全性と再現性の土台。
基準法マスター／ワーキングセルバンク方式
Standard Process Map微生物・発酵
糸状菌製造 基準工程マップ
この基準工程マップは、糸状菌（アスペルギルス等）による生産と分析を発酵→回収→精製→品質特性解析の順に整理しています。最適な手法は宿主・分泌量・プロテアーゼ管理で変わるため、各工程に代替・補完法も併記しています。
製法の条件で切り替える
◇の付いた8工程は、この条件で基準法が変わります。
全体像
工程名を押すと、その工程の説明へ移ります。工程を押すと、その場で詳しい説明が開きます。◇は条件で基準法が変わる工程です。
製法の条件で切り替える
◇の付いた8工程は、この条件で基準法が変わります。
細胞株・シード（2工程）
工程2：種培養と接種菌量の管理
種の世代数・形態・濃度のぶれが本培養のマクロ形態と生産性を直接左右する。
基準法段階的シードトレイン（フラスコ→種タンク）＋生菌数（CFU）平板計数と顕微鏡形態確認
培養・産生（3工程）
工程3：培地・空気滅菌
数日に及ぶ長時間培養で一度の雑菌混入が致命的、培地と通気の確実な無菌化が歩留まりの前提。
基準法連続滅菌（HTST、約140℃・30〜120秒）＋通気の除菌フィルタろ過（0.2µm）
工程4：本培養と基本工程パラメータ制御
温度・pH・DO・撹拌が酵素分泌量を支配し、設定値維持がロット間再現性と収量を決める。
基準法撹拌槽（STR）流加培養（fed-batch）＋pH・温度・DO・通気のカスケード制御
工程5：オンライン菌体量モニタリング
塊状で濁度が使えない糸状菌の生菌量と形態を把握し、粘度・酸素供給の問題を先回りで手当てする。
基準法キャパシタンス（誘電率）法によるオンライン生菌体量モニタリング
回収・清澄化（4工程）
工程6：コンディショニング
◇ 分岐糸状菌の粘性ブロスは凝集とpH調整なしには真空ろ過で目詰まりし生産株も残る
基準法酸/アルカリによるpH調整＋無機塩・カチオン性ポリマーによる凝集（フロキュレーション）と生産株不活化
有機酸（クエン酸）回収では
石灰（Ca(OH)₂ミルク）添加によるクエン酸カルシウム沈殿のためのアルカリ化（菌体ろ別後の清澄液に対して）
工程7：一次固液分離・ハーベスト
目的物が分泌酵素か菌体内かで回収戦略が分岐し、固形分除去で清澄液を得るのが起点。
基準法ロータリードラム真空ろ過（プレコート）または遠心分離による菌体除去
工程8：清澄化／デプスろ過
真空ろ過後のろ液には微細菌糸片・コロイドが残り後段UF膜とカラムを汚す
基準法セルロース系デプスフィルタによる二段清澄ろ過（粗→精）
工程9：濃縮・バッファ交換／UF・DF
◇ 分岐薄く大量の清澄液を膜で濃縮し塩・低分子を除去、後段の精製と製剤を効率化する。
基準法限外ろ過（UF）による濃縮＋ダイアフィルトレーション（DF）による脱塩・バッファ交換
有機酸（クエン酸）回収では
多重効用蒸発缶による減圧濃縮（UF/DFは不適用）
精製（3工程）
工程10：バイオバーデン低減ろ過
濃縮液の生菌・微生物負荷をカラム負荷前に下げ樹脂とプロセスを保護する
基準法0.2µm滅菌グレード膜によるバイオバーデン低減ろ過
工程11：クロマト精製・ポリッシング
◇ 分岐食品・診断など高付加価値用途で夾雑タンパク・凝集体を除き、目的物に応じた分離モードを選ぶ。
基準法イオン交換
有機酸（クエン酸）回収では
クエン酸カルシウム沈殿→硫酸で遊離（石膏副生）→活性炭脱色→強酸/弱塩基イオン交換樹脂で脱塩→晶析（[11]に相当）
工程12：晶析・脱色精製
◇ 分岐クエン酸等の低分子代謝産物はタンパクと別経路で、沈殿・脱色・晶析により規格純度へ。
基準法石灰によるクエン酸カルシウム沈殿→硫酸で遊離→活性炭脱色→晶析（クエン酸代表例）
有機酸（クエン酸）回収では
この沈殿‐晶析工程は有機酸（クエン酸）側の中核回収・精製工程であり、分泌酵素では実施されない（酵素は本工程をスキップしクロマト/UF系で精製する）
製剤・充填（3工程）
工程13：液体製剤化・フィル
◇ 分岐失活しやすい酵素に安定剤を加え活性を標準化し、顧客が一定力価で再現使用できる状態にする。
基準法安定剤添加＋活性標準化＋バイオバーデン低減ろ過（液体酵素製剤）
有機酸（クエン酸）回収では
クエン酸は晶析・遠心分離・乾燥による結晶製品化（無水/一水和物）
工程14：噴霧乾燥・粉末化
濃縮液を流動層造粒する前にスプレードライで安定な乾燥粉末にする必要がある
基準法回転ディスク／二流体ノズル噴霧乾燥による濃縮液の乾燥造粒
工程15：固形製剤化・造粒
粉末酵素は吸入アレルゲンになり得るため低発塵造粒とコート化で安全性と保存安定性を両立する。
基準法流動層造粒＋コーティングによる低発塵酵素グラニュール化（必要に応じスプレードライ）
品質特性・分析（4工程）
工程16：力価測定
◇ 分岐酵素の価値は質量でなく活性で決まり、規定基質・条件での反応速度測定が表示力価を保証する。
基準法基質特異的な酵素活性アッセイ（FCC規定の比色／滴定法、定義された活性単位）
有機酸（クエン酸）回収では
水酸化ナトリウム標準液による酸塩基滴定（フェノールフタレイン指示薬、1N NaOH 1mL=64.03mgクエン酸）で含量99.5〜100.5%を確認
工程17：純度・夾雑タンパク確認
◇ 分岐目的酵素の存在と夾雑タンパクの少なさを分子量パターンと純度で可視化し製造の一貫性を裏づける。
基準法SDS-PAGE（必要に応じ銀染色）＋総タンパク定量（BCA／Bradford）
有機酸（クエン酸）回収では
シュウ酸塩限度試験、硫酸塩・塩化物試験、重金属（≤0.001%）、強熱残分（≤0.05%）、水分（カールフィッシャー/乾燥減量、無水品≤0.5%）
工程18：マイコトキシン安全性試験
◇ 分岐株・環境次第で毒素を作り得る糸状菌で、最終製剤の毒素不検出を検出限界レベルで確認する。
基準法LC-MS/MSによるマイコトキシン多項目分析
有機酸（クエン酸）回収では
FCC/JECFAクエン酸モノグラフの規格試験（シュウ酸塩・重金属・残留溶媒等）
工程19：微生物学的品質試験
雑菌・病原菌と生きた生産株の残存不在を示し、衛生安全と改変株の環境放出防止を担保する。
基準法総生菌数・大腸菌群／大腸菌・サルモネラ試験＋生産株の不活化・不検出確認（FCC/薬局方準拠）
公開情報にもとづく一般的な整理です。実際の構成は条件により異なります。