シリーズ全9本・合計 約54分

Protein A精製を使いこなす

抗体を最初に捕まえるProtein A樹脂の容量・溶出・洗浄・寿命を、どの数字で判断するかが分かります。

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  1. 入門この分野がはじめての人は、ここから読んでください。
  2. Protein A精製とは?樹脂をアルカリ耐性と溶出pHで選ぶのはなぜかProtein A精製とは?樹脂をアルカリ耐性と溶出pHで選ぶのはなぜかProtein A精製とは、抗体に結合するタンパク質(Protein A)を固定した樹脂に培養液を流し、抗体だけを捕まえて取り出す工程のことです。1本目・約6分
  3. 基本仕組みと決まりを、ひとつずつ説明します。
  4. Protein Aの動的結合容量(DBC):破過曲線・QB10%とカタログ値の読み方Protein Aの動的結合容量(DBC):破過曲線・QB10%とカタログ値の読み方Protein A樹脂のカタログには、同じ樹脂の結合容量が2つ並んでいることがあります。Cytiva の HiTrap MabSelect PrismA の仕様では…2本目・約7分
  5. Protein A樹脂の溶出pHをどう選ぶか:酸に弱い分子の場合Protein A樹脂の溶出pHをどう選ぶか:酸に弱い分子の場合同じ抗体を同じ酸性の液に置いても、Protein Aのカラムを通したあとのほうが、凝集が速く進むことがあります。3本目・約6分
  6. Protein Aレジンの再生・CIP:洗浄の流れと決めどころProtein Aレジンの再生・CIP:洗浄の流れと決めどころ2025年に PDA の論文誌に載った、複数の製薬会社による共同の振り返りは、使い回した Protein A 樹脂と陰イオン交換樹脂では…4本目・約6分
  7. Protein Aリガンド漏出(リーチング)とは?測定と除去の勘どころProtein Aリガンド漏出(リーチング)とは?測定と除去の勘どころ高容量のProtein A樹脂3種を、実際の運転に近い洗浄を挟んで50回繰り返した比較試験があります(Hahn ら)。5本目・約7分
  8. 実務現場で迷う判断と、確かめる手順を説明します。
  9. Protein Aレジンの寿命とコスト:交換の線の引き方Protein Aレジンの寿命とコスト:交換の線の引き方Protein A樹脂の代金を、作った抗体1 gあたりに直すと、使い回しが5回なら約67ドル、100回なら約3ドルです。6本目・約7分
  10. Protein Aレジンは何サイクルで交換すればいい?回数と状態の二本立てProtein Aレジンは何サイクルで交換すればいい?回数と状態の二本立て次のロットの樹脂を発注する段になって、購買から「このカラムはあと何回使えるのか」と聞かれることがあります。7本目・約5分
  11. Protein A樹脂の寿命を延ばすCIP:薄いNaOHが逆効果になる理由Protein A樹脂の寿命を延ばすCIP:薄いNaOHが逆効果になる理由Protein A樹脂の寿命は毎回の洗浄(CIP、cleaning in place)の条件で大きく変わり、洗浄に使う水酸化ナトリウム(NaOH)を推奨より薄くすると…8本目・約5分
  12. Protein A樹脂を1.5 M NaOHに22時間浸けて、容量が8割残ったProtein A樹脂を1.5 M NaOHに22時間浸けて、容量が8割残ったProtein A樹脂のCIP(カラムに詰めたまま洗う定置洗浄)では、NaOHを濃くすれば汚れは落ちますが、抗体をつかむリガンドが少しずつ傷みます。9本目・約5分

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