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核酸医薬の純度・含量とは？（全長率・二本鎖含量・濃度）
siRNA/ASO/mRNA/pDNAなどの核酸医薬では、全長率やn-1などの不純物、二本鎖含量、そして濃度・含量が品質と用量精度を左右する。純度と含量の評価は核酸医薬の規格管理の中心です。
純度・含量を見る理由
全長率・n-1不純物は活性と安全性に影響
二本鎖含量はsiRNAのアニーリング品質を示す
濃度・含量は用量精度に直結する
手法の比較 ― どの方法で測るか
| 手法 | 原理 | 何が分かる | 使い分け |
|---|---|---|---|
| UV分光（A260） | 260nmの吸光で核酸を定量 | 濃度・含量、A260/A280純度比 | ルーチン定量の基本 |
| IEX/RP-HPLC（UPLC） | 電荷・疎水性で分離 | 全長率・n-1等の不純物（%） | 純度評価の主力 |
| キャピラリー電気泳動（CE） | 高分解能で鎖長を分離 | 全長率・短鎖不純物 | 高分解能の純度評価 |
| 蛍光定量（Oli/RiboGreen） | 蛍光色素で高感度に定量 | 低濃度の含量 | 微量試料の定量 |
こんな場面で使う
- siRNA二本鎖の含量・アニーリング確認
- オリゴ/mRNAの全長率・不純物評価
- 原薬・製剤の濃度・含量測定
主な測定項目
- 全長率・n-1等の不純物（%）
- 二本鎖含量（%）
- 濃度・含量（A260/蛍光）
関連分析とのつながり
純度・含量を評価するときのポイント
全長率とn-1等の不純物を分けて見る
二本鎖含量でアニーリング品質を確認する
濃度はUVと蛍光で目的に応じて使い分ける
HPLCとCEで分解能を補完する
標準品・参照配列で同定を担保する
用量精度のため含量規格を設定する
