多属性法（MAM）とは？従来の試験をどこまで置き換えられるか

Proglenth 編集部公開 2026-07-20更新 2026-10-09約6分で読めます

電荷変異体、糖鎖、酸化、脱アミド化。抗体の品質試験の一覧には、同じ分子を別々の方法で測る項目が並んでいます。これが1回のLC-MS測定でまとめて読めるなら、試験は何本減るのでしょうか。

結論は、減るが全部は減らない、です。多属性法（MAM、Multi-Attribute Method）は、抗体をペプチドに切って質量分析で読み、複数の品質特性を部位ごとに定量します。電荷変異体のイオン交換の試験を置き換えた商業製品の報告があり、糖鎖のHILICも置き換えの候補に挙がっています。一方で、凝集体の試験や生物活性の試験は残ります。

ただ、MAMの価値は試験の本数よりも、標準品に無い新しいピークを自動で拾える点にあります。そして導入の難しさも、そこにあります。品質やCMCの担当にも、受託先の報告書を受け取る人にも、この二つを先に押さえておくと判断しやすくなります。

試験を束ねる ― 分子全体の割合と部位ごとの割合

従来の試験は、同じ抗体を別々の見方で測ってきました。陽イオン交換クロマトグラフィーやキャピラリー等電点電気泳動（cIEF）は電荷の違いで分け、酸性側のピークが全体の何%かを出します。HILICは糖鎖を切り出して、糖鎖ごとの割合を出します。それぞれに規格とバリデーションと試験法の移管の手続きが付いてきます。

MAMは、これを一つの流れにまとめます。抗体を酵素でペプチドに切り、LC-MSで読むところはペプチドマッピングと同じです。違うのは読んだあとの使い方で、酸化、脱アミド化、糖化、C末端リジン、糖鎖の付き方を、ペプチドごとの質量の違いとして拾い、ピーク面積の比から割合を出します。2015年にAmgenの研究者らがmAbs誌に報告した方法で、高分解能の質量分析と、同定と相対定量を自動で行うソフトを組み合わせていました。

ここで見落としやすいのが、数字の意味が変わることです。電荷変異体の試験が答えるのは「酸性側のピークは全体の何%か」という、分子全体の数字です。酸性側には脱アミド化もシアル酸も糖化も一緒に入っています。MAMが答えるのは「この位置のアスパラギンの脱アミド化は何%か」という、部位ごとの数字です。単位が違うので、そのまま並べても比べられません。置き換えるときは、同じロットを両方の方法で測り、規格を部位ごとの言葉に置き直す橋渡しが要ります。

では、どこまで置き換えられるのでしょうか。置き換えの候補に挙がるのは、電荷変異体のイオン交換やcIEF、糖鎖のHILICなどです。欧州製薬団体連合会（EFPIA）が2022年10月にまとめた立場文書は、HPLCやキャピラリー電気泳動による複数の純度・不純物試験を、部位ごとに量れる一つの方法に束ねる意義を述べ、MAMを出荷判定と安定性試験に使うときの規制上の論点を整理しています。一方で、MAMで見られない特性もあります。サイズ変異体と凝集体はSECや非還元CE-SDSに、生物活性はバイオアッセイに残ります。

試験	MAMで置き換えられるか	理由
電荷変異体（イオン交換など）	置き換えた例がある	電荷を変える修飾を、部位ごとに定量できる
糖鎖（HILICなど）	置き換えの候補になる	糖鎖の付いたペプチドの質量から、糖鎖の組成を読める
凝集体・サイズ変異体（SEC、非還元CE-SDS）	残る	会合や分子の大きさの情報は、ペプチドに切った時点で失われる
生物活性（バイオアッセイ）	残る	構造の数字は、効き目そのものではない

分子全体の質量を見るインタクト質量分析も、切る前の情報を見る方法として別に残ります。宿主細胞タンパク質は目的分子の一部ではなく、ペプチドマップの主役にはなりません。LC-MSによるHCP評価のような専用の分析が引き続き要ります。

左に抗体（同じロット）があり、そこから二つの道に分かれる。上の道は酵素でペプチドに切って、1回のLC-MSで読むMAM。ペプチドごとの質量の違いから、酸化、脱アミド化、糖化、C末端リジン、糖鎖を部位ごとの割合で出す。これで束ねられる従来の試験は、電荷変異体（イオン交換、cIEF）で置き換えた例があり、糖鎖（HILIC）は置き換えの候補。下の道は切らずに分子のまま読む試験で、従来の試験が残る。ペプチドに切った時点で大きさや会合の情報は失われるため、凝集体・サイズ変異体（SEC、非還元CE-SDS）、分子全体の質量（インタクト質量分析）、生物活性（バイオアッセイ）が残る。図の下段は数字の単位の違い。従来の電荷変異体の試験は、酸性側の山が全体の何%かという一つの数字で、その中に脱アミド化、シアル酸、糖化が一緒に入っている。MAMは、この位置の脱アミド化、この位置の酸化、糖鎖の付き方のように、部位ごとに別の数字が出る。単位が違うのでそのまま並べても比べられず、同じロットを両方で測って橋渡しする。棒の長さは割合を表さない模式図。 — MAMが束ねる試験と、束ねずに残る試験、置き換えると数字の単位が変わることの概念図

MAMが引き受けるのは「構造を部位ごとに見る試験」です。分子全体の状態や効き目を見る試験は、これからも残ります。

新しいピークを見張る ― 規格に無い変化を拾う

実務で効くのは、試験の本数よりこちらです。

従来の規格は、決めた項目しか見ません。酸化は測っていても、想定していなかった新しい修飾や、別の分子の混入、工程を変えたときに出た見慣れない成分は、測る項目が無ければ誰も気づきません。MAMには、標準品のペプチドマップに検体のマップを重ねて、標準品に無いピークと、標準品より大きく増減したピークを自動で拾う機能があります。新規ピーク検出（NPD、New Peak Detection）と呼びます。規格の項目が「あらかじめ決めた質問」への答えだとすれば、NPDは「何か変わったか」という質問に答えます。

効くのは、工程を変えた前後の比較や、長く保存したあとの劣化物の探索のように、何が出るか分からない場面です。

難しいのは、拾う感度の決め方です。感度を上げるほど微量の変化を捉えられますが、ノイズや同位体のピークまで拾って、偽の検出が増えます。閾値を上げると偽の検出は減る代わりに、本物の微量な変化を見逃します。Agilentが2026年のASMSで新規ピーク検出のポスターを示したように、閾値の決め方は装置メーカーも扱う実務の論点です。偽の検出を抑えながら新規ピークを確実に拾うことは、MAMを品質管理に広げるうえでの大きな課題の一つです。

偽の検出の代表が、試料の調製が作った変化です。変性と還元と消化のあいだに起きる酸化や脱アミド化は、製品がもともと持っていた変化ではありません。標準品を同じ手順で処理して並べるのは、この偽の変化を差し引くためです。調製で何が起きるかはペプチドマッピングにまとめてあります。

ピークが一つ見つかったあとの手順も、先に決めておく必要があります。見つかったピークが何かをMS/MSで同定し、品質や安全性に影響するかを評価し、記録に残す。この流れを誰がどの基準でいつまでに行うかが決まっていないと、拾えること自体が処理しきれない負担に変わります。

新規ピーク検出は、見張りを置くことと、見張りが知らせたときの手順を決めることが一組です。

GMPで使うまでに整えるもの ― 装置より周辺

装置を入れるだけでは、出荷判定に使えません。

道具立ては、ここ数年で整ってきました。USPはMAMの一般章〈1060〉を2025年に公式化しています。2026年5月にはAgilentが、規制下のQCラボでMAMを日常運用するための統合ソリューションを発表しました（ニュース）。FDAも、USPがMAMの知識基盤を作る事業に資金を出しています。残るのは、現場で決めておく取り決めです。

一つめは、データ処理の管理です。質量分析のデータは大きく、処理の設定が結果を左右します。どの版のソフトで、どの設定で処理したかが記録に残り、あとから変えられない仕組みが要ります。21 CFR Part 11が求める監査証跡と権限管理を、データ処理まで含めて満たす必要があります。

二つめは、毎回の確認です。従来のクロマトグラフィーの分離度や繰り返し精度に加えて、MAMでは質量の精度や標準品の結果も確かめ、外れていれば測定を止めます。

三つめは、装置が変わったときの移管です。感度もイオン化の具合も装置で違うので、同じ値が出るとは限りません。分析法のバリデーションとライフサイクルの管理は、ICH Q2(R2)とQ14の枠組みで進めます。

四つめは、すでに承認された製品で試験法を替えるときの手続きです。規格を部位ごとに置き直し、橋渡しのデータを示す作業は、試験室の中では終わりません。

MAMで重いのは質量分析そのものより、その周りの記録と手順です。