シリーズ全10本・合計 約63分

AAVベクターをどう作るか

遺伝子を運ぶAAVベクターを、血清型の選び方から作らせる細胞、捕まえる精製、充填まで、作る順に理解できます。

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  1. 入門この分野がはじめての人は、ここから読んでください。
  2. 遺伝子治療ベクターの選び方とは?AAV・レンチ・非ウイルスの判断軸遺伝子治療ベクターの選び方とは?AAV・レンチ・非ウイルスの判断軸遺伝子治療ベクターは、治療用の遺伝子を目的の細胞まで運ぶ運び屋です。候補になるのは、AAV(アデノ随伴ウイルス)、レンチウイルス、アデノウイルス、非ウイルスの4つです。1本目・約5分
  3. AAVの血清型と組織指向性とは?選び方と選び間違えたときの代償AAVの血清型と組織指向性とは?選び方と選び間違えたときの代償同じAAV(アデノ随伴ウイルス)ベクターでも、1人に打つウイルスの数は桁違いです。網膜に注射するルクスターナ(AAV2)は片目に約1500億個…2本目・約7分
  4. 基本仕組みと決まりを、ひとつずつ説明します。
  5. AAVベクターの製造工程とは?培養から空・実カプシド分離までAAVベクターの製造工程とは?培養から空・実カプシド分離までAAV(アデノ随伴ウイルス)ベクターは、遺伝子を細胞に届けるためのウイルスベクターです。AAVベクターの製造工程は、細胞に3種類のプラスミドを入れてウイルスを作らせ、集め…3本目・約6分
  6. AAVのトリプルトランスフェクション、プラスミド比の決め方と確認点AAVのトリプルトランスフェクション、プラスミド比の決め方と確認点トリプルトランスフェクションは、AAVベクターを作るときに、3種類のプラスミドを同時に細胞へ入れる方法です。4本目・約5分
  7. AAV製造の一過性トランスフェクションと安定産生細胞株:違いと選び方AAV製造の一過性トランスフェクションと安定産生細胞株:違いと選び方AAVベクターの作り方は、大きく2系統に分かれます。rep/cap・ヘルパー・導入遺伝子をプラスミドで毎バッチ入れる一過性トランスフェクションと…5本目・約9分
  8. AAV製造の培養法:浮遊と接着、面積と容量の読み方AAV製造の培養法:浮遊と接着、面積と容量の読み方AAVの製造設備のカタログには、固定床バイオリアクターの培養面積500 m²と、撹拌槽の2,000 Lという数字が並びます。6本目・約6分
  9. 付着細胞の大量培養とは?多層・マイクロキャリア・固定床の選び方付着細胞の大量培養とは?多層・マイクロキャリア・固定床の選び方Cytiva の固定床バイオリアクター iCELLis 500+ は、最大500 m²の培養面を、およそ3.2 m²の設置面積に収めています。7本目・約6分
  10. AAVアフィニティー樹脂の選び方:結合容量の桁より見るべきことAAVアフィニティー樹脂の選び方:結合容量の桁より見るべきことAAV用アフィニティー樹脂のカタログを見比べると、Thermo FisherのAAVXは結合容量を10の13乗超(ゲノムコピー)…8本目・約6分
  11. 実務現場で迷う判断と、確かめる手順を説明します。
  12. AAV製剤のfill-finishとは?力価が目減りする三つの場面AAV製剤のfill-finishとは?力価が目減りする三つの場面承認されたAAV遺伝子治療薬でも、保管の条件は製品ごとにまるで違います。Luxturna(ボレチゲン ネパルボベク)は−65℃以下で冷凍保管し…9本目・約6分
  13. AAVカプシドエンジニアリングとは?指向性進化の強みと落とし穴AAVカプシドエンジニアリングとは?指向性進化の強みと落とし穴静脈に注射するだけで、マウスの中枢神経の広い範囲に遺伝子を届けられるAAVの殻があります。2016年に報告されたAAV-PHP.Bは…10本目・約7分

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