創薬候補を選んでいる10項目のうち3番目

スクリーニングの系を組む

当たりと外れを見分けられる評価系を作り、候補を拾う

いつまでに: 化合物ライブラリーや抗体のクローンを本番で流す前
関わる人: 研究（アッセイ開発・化学・抗体創出）

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出発点（標的ベースか表現型か）標的と病気の結びつきが強ければ標的ベース、機序が分からず疾患に近い細胞系が使えるなら表現型を選びます。表現型なら、ヒットのあとの標的同定の手法と担当を先に決めます。この記事で詳しく表現型か標的ベースか？創薬スクリーニングの出発点の選び方約7分
評価系の分離能（Z′因子）陽性対照と陰性対照の分かれ方を、差（S/B比）とばらつき（CV）の両方から1つにまとめた値で見ます。平均値だけでなく、いちばん低いプレートの値も見ます。目安0.5以上が広く使われる目安（Zhang、1999年）。Assay Guidance Manual は新しいアッセイを3日間測り、すべてのプレートで0.4以上を目安とするこの記事で詳しくZ因子(Z′-factor)とは？0.5を超えれば使えるアッセイと言えるのか約5分
対照の強さ効き目が半分になる濃度（EC50）付近の対照も置き、そのばらつきが小さいかを見ます。小さければ、弱い当たりも拾える見込みが立ちます。この記事で詳しくZ因子(Z′-factor)とは？0.5を超えれば使えるアッセイと言えるのか約5分
見かけの活性を外す（低分子）濃度を変えた再試験で IC50 が出るか、凝集や測定系への干渉で見かけの活性が出ていないか、細胞毒性で見かけの変化が出ていないかを確かめます。この記事で詳しくPAINSフィルターとは？ヒットを捨てる前に確かめる3つのこと約4分
残す基準（抗体）培養上清で、結合・発現量・配列の系統（CDR）の3つで残し、標的のないウェルで出る偽陽性と、多くの分子に弱くくっつく多反応性を早めに外します。上清のシグナルは抗体の濃度をそろえるか補正して比べます。この記事で詳しく抗体の一次スクリーニングとは？結合の強さだけで候補を選ばないのはなぜか約5分
別の系での再現表現型のヒットは、別の細胞株や別の読み出しでも再現するかを見ます。細胞株を変えるだけで消えることがあります。この記事で詳しく表現型か標的ベースか？創薬スクリーニングの出発点の選び方約7分

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終えたときに手元にあるものZ′因子とその内訳を日数・プレートごとに示した評価系の検証記録と、残す基準・外す基準を書いたスクリーニング計画書

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研究・非臨床の工程マップ｜探索・設計候補スクリーニング

なぜ必要か

評価系が当たりと外れを見分けられないまま本番を回すと、偽の当たりを確かめる実験が増え、本物の当たりは見逃されるからです。この先の候補選びは、すべてこの系で拾ったものの中から行います。

見落としやすいこと

Z′因子が目安の0.5を超えていても、強い陽性対照だけで出した値なら、スクリーニングで拾いたい弱い当たりを拾える根拠にはなりません。
細胞を使うアッセイでは、生化学のアッセイほど高い Z′が出ないことが多く、同じ線を当てると使える系まで捨てることがあります。
Z′は平均と標準偏差から出すため、気泡や分注ミスのウェル1つで大きく下がります。中央値を使うロバスト Z′と並べると、外れ値かアッセイ全体の問題かを切り分けられます。
一次スクリーニングで捨てたクローンや化合物は取り戻せないため、迷うものは理由を添えて次の段階へ渡します。